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上海笃玛生物科技有限公司
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100T
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文献和实验利用 MACSQuant Tyto 细胞分选实现帕金森病的首次人类 iPSC 衍生多巴胺能祖细胞临床移植试验
细胞群进一步培养并用于临床细胞移植。在临床前的工作中,他们使用传统的液滴式细胞分选仪对这些细胞进行分选。 Corin 阳性神经祖细胞分化为多巴胺能祖细胞,并最终移植到帕金森病患者体内。研究人员在细胞分选后获得了很好的纯度, 但低细胞存活率影响了后续细胞发展与功能。 此外,细胞分选过程需要大量的人力。Dr. Doi 说明 ”当使用传统的液滴式分选系统时,我们每 10 分钟手动更换一次分选瓶,且须不间断连续 16 小时;这对于一个有望成功的细胞治疗是不可行的。”因此,他们开始寻找其他细胞分选解决
定OD值,可向每孔中加入10 μL 0.1 M HCl溶液或者1%(W/V)SDS溶液,并遮盖培养板避光室温保存。在24小时内吸光度不会发生变化。 7.结果分析: A.细胞存活率:将各测试孔的OD值减去本底OD值(空白组),各重复孔的OD值取平均数±SD。 细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100%。 B.求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。 五、经验总结 1.种板数:通过文献确认,看实验所用细胞别人是否做过,找出大致范围
实验目的 掌握细胞计数的方法。 了解区分细胞存活状态的方法。 实验用品 0.4%台盼蓝溶液、无水乙醇或95%乙醇溶液、脱脂棉 普通显微镜、试管、吸管、毛细吸管、细胞计数板、绸布。 实验原理 在细胞培养工作中,常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度,如用酶消化制备的细胞悬液中细胞活力的鉴别,冻存细胞复苏后的活力检测等。细胞悬液制备后,常用活体染料台盼蓝对细胞进行染色,进行细胞计数。台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞
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