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Port-a-patch是目前世界上最小的膜片钳系统。无论操作者有无膜片钳使用经验,均可以快速完成实验,获得高质量的数据。Port-a-Patch不仅是功能强大的科研工具,也是用于教学和快速检测细胞及离子通道的理想选择。封接效果能够达到千兆级的高阻封接,从而极大地提高了成功率。其记录模式有全细胞模式、穿孔模式以及细胞贴附式模式。完备的配件包括:快速更换内外液的自动灌流系统,温度控制仪可控制系统内部温度以保障细胞活性,显微成像配件可向用户提供显微放大系统的接口。同时,Port-a-Patch可用于电流钳实验和脂双层实验,这极大地丰富了Port-a-Patch的科研实验范围。
特点和优势:
1)操作非常简单。全过程可自动化,不用培训专人负责操作,极大的降低了膜片钳在使用上的高技术门槛
2)实验迅速,通量高。一般每天可达到50个实验数据左右。
3)药液交换迅速。细胞内、外液的交换是在平面芯片上进行,所以药液交换非常迅速,作用时间快,外灌流时间常数:~200ms内灌流时间常数:~2s。非常适合配体门控通道实验。而且在单位时间内增加实验的重复次数,提高了实验数据的质量
4)药物消耗极低。每次更换的外液仅需十几微升。
5)信号准确,噪声少。使用了先进的微型“法拉第板”替代传统的“法拉第笼”,极大的减少了噪声源,记录数据的电噪音很低(小于300 fA/500 MΩ)。
6)扩展功能多。配套扩展设备丰富,如内灌流系统、温度控制系统、脂质体制备器等等。
7)安装简单。由于它全新的设计模式,所有设备仅包括芯片封接盒(内含整合放大器)、负压吸引控制盒和放大器,安装非常简单,不需要防震工作台、显微镜、法拉第笼和显微操作仪等传统膜片钳系统必需的辅助系统。
8)软件强大。软件的功能全面,可按照操作者设定的参数方案自动执行实验,进行细胞吸附、封接和维持全细胞记录模式;并兼容常规膜片钳放大器,如HEKA EPC-9、10,Axon Axopatch 200A/B 等。
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文献和实验384通量全自动膜片钳系统IonWorks Barracuda同时检测电压门控和配基门控离子通道
recording sites. To achieve this, IonWorks Barracuda™ system is equipped with 384 individual patch-clamp amplifiers together with a 384-channel fluidic pipettor. Similar to its predecessor, IonWorks® Quattro system, IonWorks Barracuda™ system measures cell
,给生命科学研究带来了巨大的前进动力。 三、全自动膜片钳技术 膜片钳技术被称为研究离子通道的"金标准"。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术(Conventional patch clamp technique)发展到全自动膜片钳技术(Automated patch clamp technique)。 传统膜片钳技术每次只能记录一个细胞(或一对细胞),对实验人员来说是一项耗时耗力的工作,它不适合在药物开发初期和中期进行大量化合物的筛选,也不适合需要记录大量细胞的基础
在膜片钳技术的发展过程中,主要形成了四种记录模式,即细胞贴附模式(cell-attached mode或on-cell mode)、膜内面向外模式(inside-out mode)、膜外面向外模式(outside-out mode)、常规全细胞模式(conventional whole-cell mode)和穿孔膜片模式(perforated patch mode),如图11-2所示。根据研究目的和观察内容的不同,可采取相应的记录方法。此外,还有带核膜片记录、人工脂膜
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