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上海笃玛生物科技有限公司
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ELISA
ELISA
猪
血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液等
48T/96T
规格: | 48T | 产品价格: | ¥850.0 |
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规格: | 96T | 产品价格: | ¥1600.0 |
猪表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒
产品规格:96T/48T
运输方式:快递(生物干冰或冰袋运输)
使用范围:仅供科研检测,不得用于临床.
试验原理:
本试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的*终体积而异,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
ELISA试剂盒优势:
1、抗体----高效、灵敏、特异性好
2、规范包被操作----吸附均匀、吸附性好、空白值低、孔底透明度高
3、优化方案----重复性高,可靠性强
4、高标准技术服务要求:灵敏度高,特异性强
5、适用范围广:血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
如何选购好的ELISA试剂盒?
现在生物科技日益日新月异的年代,像ELISA试剂盒产品形形色色品牌也许多,随意在网上搜索下,就会出现许多关于ELISA试剂盒的公司,让您眼花缭乱,那么怎么才能在网上找ELISA试剂盒呢?
1、口碑与效劳也很重要:
一个好的公司有必要要有好的口碑,公司BIM/RD/TSZ等试剂盒的口碑便是经过客户积累出来的。从现代营销观念来说,产品和效劳相辅相承,效劳既是产品的保证也是产品的延伸,超卓的效劳带来了产品的增值和附加利益的满意。我司用真挚的效劳不只赢得了客户共同认可也赢得了朋友。用户的认可就是我们的荣誉。
2、品牌很重要:
挑选ELISA试剂盒品牌关于各位科研教师来讲,仁者见仁智者见智,有的科研教师仅仅用某一种或某二种进口的品牌,其他品牌一概不考虑;有的科研学者会测验是用各种不同品牌的ELISA试剂盒,再对其进行比较,终究挑选某一个品牌的ELISA试剂盒进行试验,本公司BIM/RD/TSZ等品牌ELISA试剂盒凭仗品质保证的技术和效劳根底,快速快捷的供货系统,高效经济解决方案,受到广阔科研者们的共同好评,成为敏捷兴起的佼佼者!
3、品质很重要:
每一位购买产品的客户都期望产品能好用,是正品,这个也是本公司一向以来坚持的准则,科学威望,一向以来是公司出产产品的行为准则之一,对客户担任,对产品担任,也是本公司一向坚持的基本准则,公司承诺:凡购买我司ELISA试剂盒产品,如产品存在质量问题(非人为因素导致),可免费包退换货!让广阔科研用户买的定心,用的安心!
ELISA试剂盒操作步骤:
1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。
[样本处理及要求]
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
[注意事项]
1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
[试剂准备]
从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
[操作步骤]
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
猪表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒
服务承诺:
一、产品品质保障(打造高品质产品,若产品质量存在任何问题,公司一律包退包换,质量有保障,解除了客户的后顾之忧)
二、提供免费代测服务(我司拥有专业酶免技术的工作人员为客户提供来样检测服务,限度实验结果的有效性)
三、提供全程技术指导(专业的科顺技术人员进行指导)
四、全天在线服务(如果您在使用ELISA试剂盒产品时有任何的疑问,或者对我们有任何意见建议,您都可以通过来电或咨询。)
[说明]
1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。
2.最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。
3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。
4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到最佳的检测结果。
5.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
6.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
7.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
8.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
如何处理ELISA测定抗体疫苗之实验数据
在ELISA试剂盒试验中我们总是碰到许多关于数据处理的难题,为了能我们更多更具体的了解在试验中数据处理的问题,下面一起来看看ELISA测定抗体之怎么处理试验数据。
ELISA做得很好的话批间CV都要有10~15%左右,用同一个抗原,但对于包被的抗原浓度对OD的影响不是很大,只要不是不同太大即可。抗血清当然要用同一个稀释度了。别的比较的话就必每批,每块板上的样品都要伴随着一个参比品一同做,参比品仍是同一个这样才干确保试验成果的可比性。
剖析:
(1)将同一只动物免疫不同时刻后抗体产生的效价进行比较。
(2)由上面能够得出一组数据,举个比如即如某个免疫间期抗体升高2倍的有多少,升高4,8,16...的各有多少,然后可知大多数情况下可升高多少,即此种升高率的阳性率,然后再用泊松散布证明此阳性率是否赞同整体在这个免疫间期增高的阳性率,仍是由于随机误差的原因使试验得到了这个成果。
(3)计算出不同间期的效价水平后,能够用方差剖析进行整体比较,证明不同间期免疫的作用差异是否有计算学含义;然后再两两之间进行比较,看免疫作用*显着的是哪个间期。
ELISA试剂盒运用应当留心哪些事项
1、ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2、浓洗刷液可能会有结晶分出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗刷时不影响效果。
3、各步加样均应运用加样器,并常常校正其准确性,以避免实验过失。一次加样时刻最好控制在5分钟内,如标本数量多,举荐运用排枪加样。
4、请每次测定的一同做规范曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于规范品孔榜首孔OD值的),请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定,核算时请最终乘以总稀释倍数(×n×5)。
5、严格按说明书的操作进行,ELISA试剂盒效果判定有必要以酶标仪读数为准.
6、本试剂不同批号组分不得混用。
7、封板膜只限一次性运用,以避免穿插污染。
8、悉数样品,洗刷液和各种废弃物都应按感染物处理。
9、底物请避光保存。
ELISA检测试剂盒承诺
公司长期与各大高校、医院及科研单位保持着良好的合作关系,公司的产品质量及服务态度得到了他们的一致认可。笃玛生物本着客户至上的原则为客户提供优质产品,公司承诺产品有任何质量的问题免费包退换(非人为因素造成的)。公司提供免费代测服务,并且承诺收到样本七个工作日出结果,确保数据的准确性。
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