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脂蛋白酯酶(Lipoprotein lipase,LPL)试

剂盒(分光光度法)
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  • 上海
  • DM-FAM1037
  • 2026年01月15日
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    • 保质期

      6个月

    • 保存条件

      2-8°

    • 库存

      999

    • 供应商

      上海笃玛生物科技有限公司

    • 规格

      50管/24样

    脂蛋白酯酶(Lipoprotein lipase,LPL)试剂盒

     

     分光光度法50/24样

    注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义

    脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶,可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯,以供组织氧化供能和贮存,并在不同的组织表现出不同的生理意义。

    测定原理

    脂蛋白酯酶水解4-硝基ben棕榈酸酯产生4-硝基ben酚,在400nm有特征吸收峰。

    自备实验用品及仪器

    天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。

    产品细节图片1

    试剂盒的组成

    基础试剂:通常为试剂 1(R1)、试剂 2(R2),部分试剂盒可能含试剂 3(R3)等,主要成分包括缓冲液、酶、底物、辅助因子等,需标注各组分的装量(mL / 瓶)或可测试数量。

    配套校准 / 质控组分(如适用):校准品:含被测物标准品,搭配特定基质(如人血清、BSA 等),提供明确靶值,且定值需溯源至国际 / 国家标准品;

    质控品:含不同浓度(高 / 中 / 低)被测物,用于验证检测结果准确性,靶值范围为批特异;

    配套耗材(如适用):如塑料滴管、封板膜等,标注具体数量。

    注:不同批号试剂盒的各组分不得混用;校准品、质控品的赋值仅适用于本批号试剂盒。

     

    测定步骤

    步骤序号

    操作步骤

    操作要点

    注意事项

    1

    实验准备

    1. 试剂盒组分(R1、R2、标准品、质控品)室温平衡 15-20 分钟;

    2. 处理待测样本(血清 / 血浆 / 匀浆等),按需稀释;

    3. 校准微量加样枪,设置酶标仪检测波长

    1. 试剂避免反复冻融;

    2. 样本无溶血、脂血;

    3. 吸头一次性使用

    2

    微量加样

    反应板各孔加样(单孔用量): - 空白孔:稀释液 20μL + R1 100μL; - 标准 / 质控孔:标品 / 质控品 20μL + R1 100μL; - 样本孔:样本 20μL + R1 100μL;轻1. 严格控制温育温度与时间;

    2. 反应板加盖防液体蒸发轻混匀,室温孵育 5 分钟

    1. 加样顺序不可颠倒;

    2. 吸头勿接触孔壁,防止挂壁;

    3. 避免试剂交叉污染

    3

    温育反应

    各孔加 R2 20μL,混匀后 37℃温育 10-15 分钟(按说明书调整)

    1. 严格控制温育温度与时间;

    2. 反应板加盖防液体蒸发

    4

    终止反应

    加终止液 20μL,轻柔混匀

    1. 终止液为强酸 / 强碱,需戴手套操作;

    2. 快速加样,保证各孔反应同步终止

    5

    吸光度测定

    酶标仪以空白孔调零,测定各孔 OD 值

    1. 测定前确认孔底无气泡、污渍;

    2. 终止反应后 10 分钟内完成检测

    6

    结果计算

    1. 计算 ΔOD=OD 样本 / 标品 - OD 空白;

    2. 以标品浓度为横坐标、ΔOD 为纵坐标绘制标准曲线;

    3. 样本浓度 = 曲线查得浓度 × 稀释倍数

    1. 标准曲线 R²≥0.99;

    2. 质控结果需在合格范围内

    7

    实验收尾

    1. 按生物安全规范处理反应废液2. 剩余试剂密封后冷藏保存;

    3. 清洗反应板 / 器材

    1. 试剂开封后尽快用完;

    2. 废弃物分类处置,避免污染

     

    产品细节图片2

    生化试剂盒的核心分类

    按检测原理和目标物类型,可分为以下几大类,覆盖多数实验场景:

    1. 代谢物检测试剂盒用于检测血糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、尿酸、乳酸、bing酮酸等小分子代谢物,原理多为终点比色法 / 速率比色法。例如血糖试剂盒通过葡萄糖氧化酶(GOD)- 过氧化物酶(POD)偶联反应,生成有色物质,吸光度与葡萄糖浓度正相关。

    2. 酶活性检测试剂盒适用于 SOD、CAT、POD、LDH、ALT、AST 等酶活性测定,以速率法为主。通过监测酶促反应过程中底物或产物的吸光度变化速率,计算酶活性单位(U)。比如 SOD 试剂盒利用氮蓝四唑(NBT)光还原法,SOD 抑制 NBT 还原的程度与酶活性相关。

    3. 蛋白定量试剂盒包括 BCA、Bradford、Lowry 法试剂盒,其中微量 BCA 试剂盒适合样本量少的场景。BCA 法基于碱性条件下蛋白与 Cu²⁺结合,还原 BCA 试剂生成紫色复合物,在 562nm 处有特征吸收峰。

    4. 离子检测试剂盒用于检测钙、磷、钾、钠等无机离子,如钙试剂盒通过钙与偶氮砷 Ⅲ 结合生成有色络合物,进行比色定量。

     

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