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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
外泌体是由细胞分泌的包含 RNA 和蛋白质的小囊泡(30~150 nm),它可将源自亲代细胞的特定物质递送至疾病发展相关的受体细胞,因此一直被认为可作为疾病进展的潜在生物标志物用于诊断,但具体机制仍不清楚。 外泌体 RNA 作为癌症诊断标志物是否可行? CircLPAR1 是外泌体中的环状 RNA 分子,在结直肠癌(CRC)患者血浆外泌体中会发生显著变化。南京医科大学团队在 Molecular cancer 发文[1],通过对 CRC 特异性的外泌体 circRNA 进行鉴定和富集,最后使用
-RAD), PCR仪 My Cycler (Bio-RAD),Direct-Pure UP 超纯水系统(RephiLe),核酸电泳仪 EPS100 (上海天能)。细菌基因组 DNA 提取试剂盒(Axygen),dNTP (Takara)三、试验方法1. 样品制备和增菌培养 接种前,先将增菌培养基煮沸 10 ~ 15 min,以排除溶解于培养基中的氧,并迅速冷却,切勿摇动。每 15 ml 增菌肉汤中接种 1 ~ 2 g 固体食品或 1 ~2 ml 液体食品,接种时将接种物慢慢接入肉汤液面以下。每份样品接种
的,为此政府已建立了检测食品中转基因成分的体制。其中,最重要的是转基因检测方法的可靠性和有效性。所以我们利用分子生物学技术建立起一套基于PCR反应的实验方案,用于食品质控实验室的工作。最要害的是第一步:DNA提取,我们做了很严格的监控 。我们依据植物基因组和质粒DNA的提取效率来选择DNA提取试剂盒。整个提取过程包括破坏细胞壁、去除RNA和利用沉淀去除蛋白质,然后将DNA吸附在层析柱上,经过洗涤后再洗脱下来。类似的方法已经用于从其他一些植物和病毒中提取DNA。PCR反应的过程分为三个阶段:(1)通过加热
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