转基因木瓜检测PRSV-YK(35S)寡核苷酸试剂盒

RNA标记

如下四类：直接标记法，加尾标记法，基于逆转录反应的标记方法，基于RNA克隆扩增的标记方法。 常用于RNA标记的方法按标记物性质分为： 放射性同位素标记：32P、35S、3H 非放射性标记：半抗原荧光素化学发光物质 地高辛 地高辛标记RNA常用的方法是将DIG与UTP共价结合形成DIG-UTP，以DIG-UTP、ATP、CTP、GTP为底物通过RNA聚合酶T7、SP6经体外转录合成标记RNA。此法多用于RNA探针的制备，一般每20~25个核苷酸可引入一个地高辛分子

原位杂交实验所用探针

探针。另外，RNA探针与DNA探针相比没有明显的优越性，而在标记、杂交和检测过程中为了避免RNA降解还需要极为小心。 目前，应用最为多的非放射性标记物有三种：生物素、地高辛和荧光素。第一个被实际运用设计的非放射性标记DNA探针是生物素。这种早期探针的标记方法是通过酶促聚合作用将生物素标记的脱氧三磷酸核苷酸掺入到DNA中。杂交后，可以利用抗生物素蛋白或链菌抗生素蛋白-酶结合来检测这些生物素标记的探针。 地高辛标记探针已有商品化 试剂 盒。地高辛作为一种半抗原，其修饰核苷

分子实验方法10:测序技术

的放射性测序法做不到的。此外，SILVER SEQUENCETM系统用未修饰的5'OH寡聚核苷酸作为引物， 减少了特殊修饰寡聚核苷酸的花费。该系统不需要放射性方法中对同位素的谨慎操作，也不需要荧光法或化学发光技术的昂贵试剂。另外，也不需要象大多数荧光法那样用仪器来检测序列条带。 Taq DNA 聚合酶在95℃时极强的热稳定性。本系统利用的测序级Taq DNA 聚合酶是一种Taq DNA 聚合酶的修饰产品，对于双链DNA 模板有非常好的效果，具有高度的准确性，能产生均一的条带，且背景低