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人(HCG)ELISA试剂盒技术原理

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  • QY-SZ0786
  • 2025年07月15日
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    • 供应商

      乔羽生物

    • 检测范围

      科研实验

    • 检测方法

      酶联检测/ELISA

    • 应用

      生物科技

    • 适应物种

      Human、 Rat、Mouse 、Monkey、Rabbit

    • 样本

      定血清、血浆、组织和相关液体

    • 规格

      96T/48T

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    产品名称:人(HCG)ELISA试剂盒技术原理
    英文名称:Human Chorionic Gonadotrophin,HCG ELISA Kit
    产品编号:QY-SZ0786
    产品性状:液体
    产品用途:科研实验专用
    产品规格:96T/48T
    客服电话:021-51867124 QQ:3063139112 邮件:3063139112@qq.com

    操作步骤:
    1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
    2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
    3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
    4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
    6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
    8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

    9.在450nm波长处测定各孔的OD值。 需要而未提供的试剂和器材
    1. 标准规格酶标仪
    2. 高速离心机
    3. 电热恒温培养箱
    4. 干净的试管和Eppendof管
    5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器
    6. 蒸馏水,容量瓶等

    计算
    以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

    试剂盒性能
    1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
    2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
    3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

    结 果 判 断 与 分 析
    1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
    2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的HSP-70标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的HSP-70含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
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