菠菜葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA试剂盒

菠菜葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA试剂盒使用说明书

⚫菠菜葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA试剂盒用于测定菠菜血清、血浆及相关液体样本中葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)的含量。

⚫ 有效期：6个月

⚫ 保存条件：2-8℃

⚫ 本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床诊断

实验原理实验

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并che底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

免责声明

1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。