编码基因定量PCR引物

【讨论】关于miRNA定量PCR时引物的一些迷惑，希望高手来指点

问题2：这里的正义和反义引物是不是就是其他文章中提及的forward和reverse） 问题3，有些文章中只有forward,和reverse引物，未见反转录引物列出，是作者漏掉了，还是根本不需要反转录引物？上述问题希望高手来指点一二。越详细越好，衷心感谢 leileicui 还有一个问题，对于不同的物种，如鼠源的与人源的miRNA分子的荧光定量PCR及反转录引物是不是不同啊，可以通用吗？ zjubell 你先了解

【求助】急求miRNA荧光定量PCR引物的设计

leileicui 如题，因为新手没有做过实验，所以请高手详细指点，如果有比较好的文章可以推荐给我，谢谢。为了方便讲解，以mir127为例，逐步讲解，谢谢 leileicui 自己顶一下。 freecell 这个你可以在google scholar里面搜索这个miRNA的qPCR引物，太多了。可以借鉴nature、science等文章中的引物和探针。 其次可以自己设计

qPCR常见问题及其分析

-110%之间都是可以接受的。3. 如何评估实时定量PCR反应的效果PCR扩增效率：为了正确地评估PCR扩增效率，至少需要做3次平行重复，至少做5个数量级倍数(5logs)连续梯度稀释模板浓度。常见问题1. 无Ct值出现检测荧光信号的步骤有误: 一般SG法采用72℃延伸时采集，Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。引物或探针降解: 可通过PAGE电泳检测其完整性。模板量不足: 对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。模板降解: 避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。2. Ct