- ￥2267
- AAT Bioquest
- 溶酶体红色 DND-99荧光探针
- 22647
- 2025年09月09日
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LysoBrite™ Red DND-99
- 英文名：
LysoBrite™ Red DND-99
- 库存：
溶酶体染料DND-99，红色
- 供应商：
溶酶体染料DND-99，红色
- CAS号：
22647
- 规格：
500T
溶酶体染料DND-99，红色
分子量 399.25 溶剂 DMSO
产品优势
1.荧光特性好：信噪比高，光稳定性强，进入溶酶体后荧光显著增强
2.细胞适用性广：适用于增殖与非增殖细胞，以及悬浮细胞和贴壁细胞
适用范围
用于标记活细胞
产品介绍
LysoBrite Red DND-99在化学结构上与LysoTracker® Red DND-99（ThermoFisher公司注册商标）完全相同，均适用于活细胞中酸性细胞器的标记与追踪。该染料对酸性细胞器具有好的选择性。LysoBrite™系列探针由荧光基团与弱碱性基团偶联而成，其特性在于中性pH条件下仅部分质子化，从而能够自由穿透细胞膜实现活细胞标记。
使用LysoBrite Red DND-99染料的分析方案
概述
准备细胞
添加染料工作溶液
在37°C孵育30分钟
洗涤细胞
在荧光显微镜下分析
储存条件
LysoBrite™ Red DND-99原液为500倍DMSO浓缩液，需在-20℃避光条件下保存，有效期至少6个月。使用时请注意避免反复冻融，以确保试剂稳定性。
LysoBrite™ Red DND-99工作液配制：
1.解冻 LysoBrite Red DND-99染料至室温。
2.将20μL的500 X LysoBrite Red DND-99染料，用10 mL 含 20 mM HEPES 的 Hank's 缓冲液（HBSS）或您选择的其他缓冲液进行稀释。
注意：1. 20μL的LysoBrite Red DND-99染料足够用于一块96孔板。将未使用完的LysoBrite Red DND-99染料原液进行分装＜-15 ℃避光保存。避免反复冻融。
2.荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。
样品实验方案
（本方案仅提供指导原则，应根据您的具体需求进行调整。）
贴壁细胞染色方案
1. 使用96孔黑色壁/透明底板（每孔100μL培养基）或于培养皿内的盖玻片上培养
2. 待细胞达到目标汇合度后，加入等体积染色工作液（按"工作液配制"步骤2制备）
3. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育30分钟
4. 用预热（37°C）的HBSS（含20mM HEPES）或自选缓冲液洗涤两次，最后加入HBSS或完全培养基
5. 使用配备所需滤光片组的荧光显微镜观察
注：若染色效果欠佳，可适当提高染料浓度或延长孵育时间
悬浮细胞染色方案
1. 直接加入等体积染色工作液（按"工作液配制"步骤2制备）
2. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育30分钟
3. 用预热（37°C）的HBSS（含20mM HEPES）或自选缓冲液洗涤两次，最后加入HBSS或完全培养基
4. 使用配备所需滤光片组的荧光显微镜观察
注：1.若染色效果欠佳，可适当提高染料浓度或延长孵育时间
2.悬浮细胞可通过BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理贴附于盖玻片后，参照贴壁细胞方案染色
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文献和实验细胞膜染料+外泌体染料双染策略，彻底解决外泌体摄取实验中的假阳性问题
呢？ EvLINK：99% 标记率，不二次标记的膜特异性染料 基于 FilmCLICK Tech. 技术开发的 EvLINK 具有极高的特异性和高于 99% 的标记率，且一旦 EvLINK 从外泌体表面脱落，其活性基团即刻变性失活，掉落的EvLINK 仅发出无法被检测的微弱荧光，不再对膜结构二次标记，避免染料二次标记带来的假阳性。Fig.1 分别为 EvLINK 对外泌体的标记率及化学模拟 EvLINK 活性基团变性后对外泌体的标记率： Fig
为8号，右后腿计为9号。若动物编号超过10或更大数字时，可使用上述两种不同颜色的溶液，即把一种颜色作为个倍数，另一种颜色作为十位数，这种交互使用可编到99号，假使把红的记为十位数，黄色记为个位数，那么右后腿黄斑，头顶红斑，则表示是49号鼠，余类推。该方法对于实验周期短的实验动物较合适，时间长了染料易退掉；对于哺乳期的子畜也不适合，因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。（二）烙印法用刺数钳在动物耳上刺上号码，然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹，烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。（三）针
、内质网、高尔基体关系密切，为了区别，常用到一些示踪蛋白在荧光显微镜下来共定位： Lamp-2：溶酶体膜蛋白，可用于监测自噬体与溶酶体融合。 LysoTrackerTM 探针：有红或蓝色可选，显示所有酸性液泡。 pDsRed2-mito：载体，转染后表达一个融合蛋白（红色荧光蛋白+线粒体基质定位信号），可用来检测线粒体被自噬掉的程度（Mitophagy）。 MitoTraker探针：特异性显示活的线粒体，荧光在经过固定后还能保留。 Hsp60：定位
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