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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
南京森贝伽生物科技有限公司
- 检测范围:
电询
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
仅供科研使用
- 标记物:
人
- 样本:
血清、血浆、细胞及相关液体
- 规格:
96T、48T
人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒免费代测实验原理:
人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒免费代测用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本的存在与否。
人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒免费代测产品介绍:
货号:SBJ-H1477
规格:96T、48T
库存状态:现货供应
保存:2-8℃,避光保存
适用范围:仅供科研使用,不得用于临床
运输方式:快递(南京客户免费送货上门)
人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒免费代测操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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素与固定在微孔板上的卵白素相结合,而探针上的地高辛与过氧化物酶标记的抗地高辛抗体结合,然后加入底物,显色后用酶标仪测定。ELISA法是宝灵曼试剂盒使用的方法,由于没有电泳,因此观察不到6bp差异的梯带。 4 质量控制 4.1 排除假阳性 设置以下四种对照(1)85℃10min灭活端粒酶;(2)端粒酶对RN ase敏感,0.5μg/10μl提取液+1μgRNase,37℃,20min;(3)不加提取液;(4)不加CX或TS引物。以上实验可排除引物二聚体或PCR污染。
。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。例如乙肝病毒中的表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗体(HBcAg),虽来源于同一病毒,但仅与其相应的抗体结合,而不与另外两种抗体反应。抗原抗体反应的这种特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。但是这种特异性也不是绝对的。假使两种化合物有着部分相同的结构,在抗原抗体反应中可出现交叉反应。例如:绒毛膜促性腺激素(hCG)和黄体生成激素(LH)均由α和β两个亚单位
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