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文献和实验上皮细胞恶性转化与肿瘤微环境（TME）重塑的共演化，而这一共演化过程对癌症的发生、进展及转移具有关键调控作用。尽管近年来基因组学及单细胞转录组学研究已揭示了 ESCC 中癌细胞突变及细胞异质性的作用，但受限于技术分辨率，单细胞水平的空间互作分析仍存在不足，对肿瘤微环境时空演化的解析尚未充分。本研究通过高分辨率 XeniumInSitu、TF-seqFISH 等空间转录组学技术，绘制 ESCC 发展的单细胞分辨率多阶段空间演化图谱，旨在解析癌相关成纤维细胞-上皮细胞（CAF-Epi）生态位的形成
一步实现单拷贝到高拷贝的转换－－Copy Control克隆技术（附图）
这个载体含有两个复制起始位点（如图1）：单拷贝的大肠杆菌F-因子复制子，和诱导型的高拷贝oriV。 OriV的启动，需要trfA基因产物，trfA基因既不在pCC1 Vector上，也不在其他常规用来克隆的大肠杆菌菌株中，这个基因由CopyControl 的第二个重要元件—— TransforMax EPI300 E.coli菌株提供。 （二）TransforMax EPI300 E.coli. 这是一个工程菌株，含有受诱导启动子严谨控制的trf A基因，在诱导
一步实现单拷贝到高拷贝的转换---CopyControl克隆技术
TransforMax EPI300 E.coli菌株提供。 2．TransforMax EPI300 E.coli. 这是一个工程菌株，含有受诱导启动子严谨控制的trf A基因，在诱导表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。 图
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