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康朗生物
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现货
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6-12个月
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5/50/箱
一细胞产品(Cell’s Product)
(一)正常人原代细胞(A:5*105 细胞数/每瓶)
(二)病人肿瘤原代细胞(5*105细胞数/每瓶)
(三)大鼠,小鼠原代细胞(C订制:1*106以上细胞数/每瓶)
(四)细胞系(株)库
1,人源性细胞系(株)2,小鼠源性细胞株,3,大鼠源性细胞系4其他源性细胞系5,杂交瘤细胞
(五),细胞培养体系(培养基,添加剂,血清及相关试剂)
二,细胞为核心生物医药技术服务外包产品(cells CRO)
三、 原代细胞共性
原代细胞现在广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA、RNA和遗传学研究等,还应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。原代细胞在生物医药领域有不可替代的作用,市场前景十分广阔。我国原代细胞用于实验才刚刚开始,随着实验要求的提高和全球生物医药研发重心的东移,我国对原代细胞的需求在逐年递增。
除了部分终末分化的细胞,一般的细胞都能传代8-10代及以上,有些细胞甚至更多,但是一般都建议客户采用3-4代以内的细胞。
在原代细胞培养过程中,一般是初次培养过夜后换液,以后每隔2-3天换一次液,以培养液的颜色为标准,一般变黄后就需换液。原代细胞的传代前期一般是3-4天传一次代,后期一般是4-6天传一次代(前期指前三代,后期指三代后)。
四,细胞系(Cell Line) 系由系列传代培养的第一次培养或其中任何阶段培养制备的细胞群(非原始培养细胞)。该细胞群通常是非均质的。
细胞系是指从某初代培养开始通过连续培养所产生的所有细胞。包括从初代培养的细胞和细胞群所发展的一系列的细胞。如果培养的状态清楚,则在前面冠以有限继代性(finite)或连续继代性(continuous)。例如,人二倍体成纤细胞系属于前者,HeLa细胞系属后者。另外连续继代性细胞系也称为树立细胞系
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文献和实验冰上,用冰冷的 PBS 洗涤细胞。2. 吸出 PBS,然后加入冰冷的裂解缓冲液(每 107 细胞/100 mm 培养皿/150 cm2 培养瓶加入 1 ml;每 5×106 细胞/60 mm 培养皿/75 cm2 培养瓶加入 0.5 ml)。3. 用预冷的塑料细胞刮棒刮下贴壁细胞,然后轻轻地将细胞悬浮液转移至预冷的微量离心管中。4. 在 4 ℃ 下持续搅拌 30 分钟。5. 在 4 ℃ 预冷的离心机中以 16000 × g 的转速离心 20 分钟。6. 轻轻地从离心机中取出离心管,置于冰上。将上清
达到70-80%就可以传代。早点传代也可以。如果是贴壁生长的细胞:1) 培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液;2) 无菌PBS或无菌生理盐水洗涤3次(按培养体积加入);3) 加入适量胰酶消化适当时间(一般胰酶为0.25%;9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶,一次加入1mL胰酶。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑,一般如果是细胞株,非原代培养,消化1-2分钟足矣);4) 用枪头吹打数十次(视细胞类型而定。一般细胞株30-50次吧,耗时一般2分钟左右);5) 加入适量体积完全培养基终止
Ⅷ 因子抗体,荧光标记二抗,乙醇丙酮混合液(1 : 1 )二、实验器械1、培养皿2、培养瓶3、直剪和眼科剪4、眼科镊和止血钳5、 10ml 注射器6、玻璃滴管7、烧杯8、 15ml 离心管三、实验流程取材↓洗涤脐带外血渍, 将胶带剪为15cm 左右长↓PBS 灌 洗,去掉淤血↓推注空气,排出残存 1 × PBS (pH 7.4 )↓注射器灌注消化液(PriCells ),至另一端有消化液流出时用止血钳截断,继续灌注消化液至 血管充盈用另一止血钳截断此端,放置到含抗生素 1 ×
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