9004S, SimpleChIP® Plus Enzyma

ChIP全线试剂&表观7大门类大促（20190715-0926），下拉至页底了解详情。


9004S试剂盒内容：

产品包括	容量（计数）	保存温度
Glycine Solution (10X)	1 x 100 ml	4°C
Buffer A (4X)	1 x 25 ml	4°C
Buffer B (4X)	1 x 25 ml	4°C
ChIP Buffer (10X)	1 x 20 ml	4°C
ChIP Elution Buffer (2X)	1 x 7 ml	4°C
5 M NaCl	1 x 3 ml	4°C
0.5 M EDTA, pH 8.0 7011	1 x 1 ml	4°C
ChIP-Grade Protein G Agarose Beads 9007	1 x 1 ml	4°C
DNA Binding Buffer	1 x 30 ml	RT
DNA Wash Buffer (add 4x volume ethanol before use)	1 x 6 ml	RT
DNA Elution Buffer	2 x 1 ml	RT
DNA Purification Columns and Collection Tubes	1 x 36 包	RT
Protease Inhibitor Cocktail (200X)	2 x 750 µl	-20°C
RNAse A (10 mg/ml)	1 x 50 µl	-20°C
Micrococcal Nuclease 10011	1 x 60 µl	-20°C
Proteinase K (20mg/ml)	1 x 100 µl	-20°C
SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers 7014	1 x 150 µl	-20°C
SimpleChIP® Mouse RPL30 Intron 2 Primers 7015	1 x 150 µl	-20°C
Histone H3 (D2B12) XP® Rabbit mAb (ChIP Formulated) 4620	1 x 100 µl	-20°C
Normal Rabbit IgG 2729	1 x 50 µl	-20°C
DTT (Dithiothreitol) 7016	1 x 192.8 mg	4°C

存储：请将组分保存在各个管标签标示的温度下。

产品说明

SimpleChIP^® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Agarose Beads) #9004 包含进行多达 30 次细胞或组织样品染色质免疫沉淀所必需的缓冲液和试剂，优化后每次免疫沉淀使用 4 X 10⁶ 个细胞或 25 mg 组织。一项完整检测可在短达两天内完成，并且可在使用更多或更少细胞或组织样品时随意扩增或缩减。

细胞或组织用甲醛固定后进行裂解，染色质与 Micrococcal Nuclease 部分消化形成片段，从而获得 1-5 个核小体的染色质片段。染色质的酶解较超声处理更为温和，可避免因超声处理期间不同的超声处理功率和染色质乳化而引发的问题，因为这些因素会因蛋白变性和降解而导致染色质碎裂不完全或抗体表位缺失。使用经 ChIP 的验证的抗体和 ChIP-Grade Protein G Agarose Beads 进行染色质免疫沉淀。在蛋白质-DNA 解交联后，DNA 使用 DNA 纯化离心柱进行纯化，以便简单快速地回收 DNA 并去除蛋白污染物，无需进行苯酚/氯仿提取和乙醇沉淀。免疫沉淀期间，特定 DNA 序列的富集度可使用标准 PCR、实时定量 PCR 等各种方法进行分析。请注意，该试剂盒不适合用于 ChIP-seq，因为ChIP-Grade Protein G Agarose Beads 已使用经超声处理的鲑精 DNA 封闭，因此会干扰下游测序。

SimpleChIP^® Plus Kit 还提供确保 ChIP 实验成功的重要对照。该试剂盒包含对人和小鼠核糖体蛋白 L30 (RPL30) 基因进行 PCR 检测所需的阳性对照 Histone H3 Antibody、阴性对照 Normal Rabbit IgG Antibody 和引物组。组蛋白 H3 是染色质的一种核心组分，能在基因组内结合多数 DNA 序列，包括 RPL30 基因座。由于几乎所有被检测基因座上富含Histone H3，因此，Histone H3 Antibody 可用作通用阳性对照。

特异性/敏感性

SimpleChIP^® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit 可与所有经 ChIP 验证的抗体一同用来检测哺乳动物细胞和组织样品中内源水平的蛋白-DNA 相互作用以及组蛋白修饰（见图 1 和 2）。阳性对照 Histone H3 Antibody 可识别许多不同物种中高度保守的组蛋白 H3，包括人、小鼠、大鼠和猴。用于人和小鼠阳性对照 RPL30 基因座的引物组也包括在内，但该试剂盒用于检测其他物种时需要设计额外的对照引物组。

背景

染色质免疫沉淀 (ChIP) 测定法是一种用于在细胞天然染色质背景下探测蛋白质-DNA 相互作用的强大的通用技术 (1,2)。这种测定法用于检测与基因组某个特定区域有关的多种蛋白，或相反，用于检测某种特殊蛋白结合的基因组的多个区域 (3-6)。它可用于确定各种蛋白被募集到某个基因启动子上的特定顺序，或用于“测定”整个基因位点上某种特定组蛋白修饰的相对数量 (3,4)。除了组蛋白外，ChIP 测定法还可用于分析转录因子与辅助因子、DNA 复制因子和 DNA 修复蛋白的结合。进行 ChIP 检测时，细胞或组织首先用甲醛固定，甲醛是一种可逆的蛋白-DNA 交联剂，可“维持”细胞中发生的蛋白-DNA 相互作用 (1,2)。细胞进行裂解，染色质采集后使用超声处理或酶消化法进行碎裂。染色质随后使用对某种特殊蛋白或组蛋白修饰具有特异性的抗体进行免疫沉淀。任何与目标蛋白或组蛋白修饰有关的 DNA 序列都会作为交联染色质复合体的一部分进行共沉淀，并且该 DNA 序列的相对数量会在免疫选择过程中达到富集。免疫沉淀后，蛋白质-DNA 交联被逆转，DNA 得以纯化。标准 PCR 或定量实时 PCR 用于测量通过蛋白特异性免疫沉淀达到富集的某种特定 DNA 序列的数量 (1,2)。或者，ChIP 测定法还可与基因组微芯片（芯片上的 ChIP）技术、高通测序或克隆策略联合使用，它们都能对蛋白-DNA 相互作用和组蛋白修饰进行全基因组分析 (5-8)。

1. Orlando, V. (2000) Trends Biochem Sci 25, 99-104.
2. Kuo, M.H. and Allis, C.D. (1999) Methods 19, 425-33.
3. Agalioti, T. et al. (2000) Cell 103, 667-78.
4. Soutoglou, E. and Talianidis, I. (2002) Science 295, 1901-4.
5. Mikkelsen, T.S. et al. (2007) Nature 448, 553-60.
6. Lee, T.I. et al. (2006) Cell 125, 301-13.
7. Weinmann, A.S. and Farnham, P.J. (2002) Methods 26, 37-47.
8. Wells, J. and Farnham, P.J. (2002) Methods 26, 48-56.

产品链接：http://www.cst-c.com.cn/products/9004.html；产品说明书：http://media.cellsignal.com/pdf/9004.pdf


验证数据详情见官网: www.cst-c.com.cn

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SimpleChIP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
Illumina 是 Illumina, Inc 的注册商标。

促销活动详情：

促销时间
2019年7月15日—2019年9月26日

优惠一

购买任一ChIP试剂盒（见下表1），将特别赠送经ChIP或ChIP-seq验证的小包装抗体一支（见下表2）或精美礼品一份（见优惠二）。

促销试剂盒列表1

货号	产品名称	应用
56383S	SimpleChIP® Plus Sonication Chromatin IP Kit（超声法，磁珠）	ChIP ChIP-seq
9005S	SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads)（酶解法，磁珠）	ChIP ChIP-seq
9004S	SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Agarose Beads)（酶解法，琼脂糖微珠）	ChIP
9003S	SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads)（酶解法，磁珠）	ChIP ChIP-seq
9002S	SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Agarose Beads)（酶解法，琼脂糖微珠）	ChIP
56795S	SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina®（DNA 文库构建）	ChIP-seq

赠送抗体列表2



优惠二

一次性购买促销抗体（优惠一中6个ChIP试剂盒除外）目录价格达7000元，即可获赠精美礼品一份。


查询参加促销的具体产品，点击此处或微信公众号「CST博士互助平台」后台回复“促销” ，了解促销详情。