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文献和实验酶怎么那么难用? pfu酶使用的一点体会 求助:请问Pfu酶使用的注意点 哪位大侠用pfu做外切酶去切除Taq酶产生的多余的A? 天然型也重组型pfu DNA聚合酶的区别 紧急求助各位高手!pfu的扩增。(问题已解决,谢谢各位!) 【讨论】以Taq和Pfu DNA聚合酶进行PCR扩增所的产物可以直接进行平末端克隆吗? 请使用过TAKARA公司LA DNA聚合酶的大侠进来谈谈 为什么pyrobest就是扩不出来,taq却可以 请教一个困惑:关于高保真PYROBEST
mol/LMg2+ 模板:PCR对模板的要求不高,单、双链DNA均可,但样品中不能混有蛋白酶、核酸酶、DNA聚合酶抑制剂以及能与DNA结合的蛋白质。添加剂:DMSO(二甲基亚枫),提高扩增效率及特异性(1)理论上PCR合成产物的数量经过每轮循环都将增加一倍,应按2n的指数方式递增,PCR反应30轮循环后,PCR扩增应达到230个拷贝,约109个拷贝。但由于DNA聚合酶的质量、待扩增片段的序列及反应系统的条件等各种因素的影响,实际扩增效率比预期的要低,一般可达106-107个拷贝平台效应”:PCR反应
pfu指的是噬菌体的空斑形成单位。以下是关于测定M13效价的一个方法:测定噬菌体滴度只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1时(即细胞过量时),噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加。正因如此,建议检测噬菌体贮液的滴度时,在感染前进行稀释,而不是在高MOI值的情况下稀释被感染的细胞。低MOI值有助于确保每个噬菌斑仅含一个DNA序列。1. 接种ER2738单菌落于5-10 ml LB培养基中,摇床培养至对数中期(OD
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