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文献和实验:使用 Anti-phospho-Akt (Ser473) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。(图 A)使用免疫组化试剂盒M&R HRP/DAB Detection IHC Kit,抗体 1:100 稀释;(图 B) 采用普通免疫组化试剂盒,抗体 1:25 稀释。 图 6 免疫组化实验检测 Erk1/2 表达 注:使用 Anti-Erk1/2 Mouse mAb与p44/42 MAPK (Erk1/2)Rabbit mAb 对正常小鼠心脏组织进行免疫
ELISA 检测噬菌体抗体与目的抗原的亲和力 【材料和试剂】 (1)酶标板 (2)酶标仪 (3)0.5mol/L Na2CO3(pH9.6) (4)1%BSA (5)HRP标记的抗M13噬菌体多抗 (6)2mol/L H2SO4 【操作步骤】 (1)将抗原用PBS或0.5mol/L Na2CO3(pH9.6)稀释至10μg/ml; (2)对于要检测的每个克隆,至少包被2个孔,每孔用200μl稀释抗原。同时包被阴性对照抗原。此外,包被阳性
)1小时; 2)2%H2O2/甲醇处理(可省略),室温20分钟,封闭内源性过氧化物酶活性; 3)PBS漂洗后1%BSA室温孵育15分钟; 4)特异性抗体(第一抗体)室温孵育3小时或4℃孵育过夜; 5)PBS充分漂洗后,HRP或生物素标记的第二抗体室温孵育30―60分钟,如系生物素标记的第二抗体 ,反应后则需进一步按ABC试剂盒要求操作; 6)PBS漂洗后,1%戊二醛0.1m01/LPB配制固定30―60分钟,PBS漂洗; 7)呈色反应:0.
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