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康朗生物
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非常品质
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文献和实验8.0,20mMTris,0.5N NaCl,8M尿素,40mM 咪唑 柱洗脱液:如pH8.0,20mMTris,0.5N NaCl,8M尿素,200mM 咪唑 柱洗脱方法:如分段洗脱,线性梯度洗脱等 3、建议说明纯化规模和纯化设备,例如: 一次纯化所用的菌体量:如10g湿菌体或500ml摇瓶发酵菌等 破菌缓冲液体积:如150ml 包涵体洗涤,溶解液体积:包涵体洗涤液每次150ml,共洗涤3次;包涵体用50ml包涵体溶解液溶解,搅拌过夜 纯化用柱类型:如XK26/20、或自制、或国产16
工欲善其事,必先利其器。对照一下,你的实验室还缺那些? (1)超声波细胞破碎机 适用于5-100g湿菌体超声破碎,实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。 (2)高压匀浆机 大规模生产用,对菌体量无限制。破菌效果好,但要注意冷却。 (3)高分散乳化机 均匀悬浮菌体用,比搅拌快,均匀性好,特别适合于大规模生产。另外,大规模生产时缓冲液的配制很有用,可快速溶解、混匀。推荐品牌:IKA 国产品牌:FLUKO; (4)中空
4度双门的那种大冷柜,可以把层析柱放进去,对温度敏感的蛋白纯化需要。冷室作用同上,更彻底,只是运行费用更大。(36)冷冻干燥机(器) 蛋白质保存较佳的方案。从手提式到药厂的大规模冻干室形式多样。(37)不锈钢层析柱架、三叉夹 柱架有商品化的卖,但是没有自己DIY的好。可以自己设计好后找做不锈钢窗户的小店去做,很便宜。夹层析柱的夹子首选三叉夹,很牢靠,最大可以夹50 mm的GE夹套XK柱。 本帖仅做引玉,大家可以就每项设备展开讨论,看看那些东东,那些品牌对我们做蛋白质纯化的人来说是好用
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