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常温,避光
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12个月
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大量
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康朗生物
- 规格:
g/mg
非常品质
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文献和实验MHC-I 单体的Mono Q柱层析 【试剂及材料】 1、材料 (1)快速蛋白液相色谱装置(FPLC) (2)层析柱(Mono Q HR5/5 Column) (3)离心过滤器(ultrafree-15,ultrafree-4) (4)50ml 聚丙烯离心管 (5)IEC GP8R 离心机 2、试剂 (1)Buffer A :20mM Tris(PH8.0) (2)Buffer B :20
二氢钠:20mM磷酸氢二钠=31mL:69mL) 二、 材料 血红蛋白溶液(Hb):取抗凝血(肝素)2mL,离心弃去上层血浆。用0.9%NaCl洗血细胞数次(颠倒混匀,离心,弃去上清液),使离心后上清液几乎无淡黄色为止。于洗净的红细胞中加入5倍体积的蒸馏水摇匀,离心去沉淀(破碎的细胞膜等)即为Hb稀释液备用。 DNP-鱼精蛋白溶液:取鱼精蛋白0.15g溶于10%NaHCO3溶液1.5mL中(此时该蛋白质溶液pH应在8.5~9.0左右)。另取二硝基氟苯0.15g,溶于
uL)至新管,加入 50 ul 7.5 M 的 NH4Ac 和 800 ul 冰乙醇(-20 °C)存放,置于冰上 15 min,使 DNA 充分沉淀,14 000×g 离心 5 min。(7)弃尽上清,置于室温晾干,加入 50~100 ul 无菌水,待 DNA 全部溶解后,加入 1 ul RNase(20 ug/ul),37 °C 孵育 1 小时,于 -20 °C 保存。(8)取 5 ul 的 gDNA 进行 1.5% 琼脂糖凝胶电泳,以鉴定其完整性,并在分光光度计测其浓度,A260/280
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