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康朗生物
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文献和实验一、目的蛋白质分子有单链、双链和寡聚蛋白等组成形式，组成蛋白质分子的单条肽链又称亚基。通过对天然蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳和变性蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱的比较，可以研究种子蛋白质分子组成和结构。另外，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是测定亚基分子质量的好方法。通过本实验，学习SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理、技术和实际应用。二、原理用十二烷基硫酸钠（SDS）和还原剂（琉基乙醇或二硫苏糖醇）热处理蛋白质样品，蛋白质分子中的二硫键被还原，解离的亚基与SDS发生1：1.4的定量结合。SDS使蛋白
酶与抗体交联的方法有许多种，根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物，可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。 一、戊二醛二步法 1. 原理： 戊二醛为一种双功能 试剂 ，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。 2 试剂 及器材： (1) 0.1MpH6.8磷酸
markers (1:20 dilution): 50ul Biorad broad/low molecular weight markers (Low MW #161 0304 Broad MW #161 0317); 950ul loading sample buffer; Aliquot 10 ul each eppendorf, freeze, load 10 ul/well/gelRemazole blue molecular weight markers.1. Dilute 10 mg
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