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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
KLH conjugated synthetic peptide derived from hu MEK6
- 亚型:
IgG
- 形态:
Lyophilized or Liquid
- 保存条件:
2-8℃短期保存或<-20℃长期保存1年
- 克隆性:
多克隆
- 适应物种:
hu, mo, rat
- 宿主:
Goat,Rabbit,Mouse
- 应用范围:
WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
- 浓度:
1mg/1ml
- 抗体名:
NIS抗体 钠碘转运体蛋白抗体
- 规格:
0.2ml/0.1ml/200μg
The antibody is a mouse monoclonal antibody raised against CRP. It has been selected for its ability to recognize CRP in immunohistochemical staining and western blotting.
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文献和实验改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体 HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基,再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联,在标记前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后,再加入硼氢化钠还原成稳定的结合物。 (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸盐缓冲液1ml中,加入1%DNFB无水乙醇溶液0.1ml,室温下轻微搅拌1h
(1) 定性及效价滴定:用特异性抗原(或抗体)同酶标记抗体(或抗免疫球蛋白抗体)作双向琼脂扩散试验或免疫电泳试验。然后用酶的底物使沉淀弧显色,可初步鉴定其活性。最后以直接ELISA法(或在正式实验系统里)对酶结合物进行滴定( 见本节 (三)工作浓度的选择)。 (2) 定量和克分子比值测定:可用分光光度计测定(光程1cm)。
酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物,可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。 一、戊二醛二步法 1. 原理: 戊二醛为一种双功能 试剂 ,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。 2 试剂 及器材: (1) 0.1MpH6.8磷酸
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