胶原包被175cm²培养瓶,600ml,透气盖,灭菌

重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作

用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。 5.      胶回收线性化质粒，以备共转化使用。 二 共转化 1  大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 ²       从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB培养基中，37℃振摇过夜。 ²       接种25ml过夜培养物于500ml LB培养基，37℃振摇，至OD600 达到0.4。 ²       迅速将培养物置于冰浴中30min，至充分冷却。 ²     

各种用途的细胞培养瓶特性

改性处理后，可以让细胞更好的进行贴壁培养，这样根据细胞贴壁面积又可以分为25～175cm2多种。 国产的 细胞培养 瓶一般盖子都是封闭的，不带内垫，常用于密闭培养，可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多：密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的，聚酯盖常用于开放培养，只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。透气盖是在瓶盖中加了0.2μm疏水滤膜，提供无菌气体交换，减少污染的风险。常用于开放培养，推荐用于CO2

重组腺病毒构建、扩增及纯化

液，加入6ml DMEM完全培养基，37℃孵育过夜，再换液。 7、培养过程中观察细胞生长情况。约2周后可观察到细胞病变（CPE）出现（如用pAdTrack-CMV质粒，由于含GFP,可观察到绿色荧光）。四、重组病毒鉴定 1、转导10-14d后，收集细胞沉淀，加入2ml灭菌的PBS混悬，冻融细胞，离心后收集上清保存于-80℃。 2、取30-50% 步骤1中上清，感染50-70%饱和度的25cm2方瓶中293细胞。2-3d后出现明显细胞病变。 3、感染后3-5d，当1/3-1/2细胞漂浮时