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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
- DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒-棕黄色产品简介:
1. DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒(DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit)是一种借助
辣根过氧化物酶(HRP),用于免疫组化显色、原位杂交显色或Western、Southern、Northern、EMSA
等膜显色的试剂盒。
2. DAB,即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride,是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧
化物酶的催化下,DAB会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇。因此在DAB显色后,还可
以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。
3. 本试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色,也可以用于
Western等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测。 同时也可以用于细胞或组织内源性的辣根过氧
化物酶显色。
4. 用于免疫组化或原位杂交时,每个片子大约使用0.2毫升显色液。 - DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒-棕黄色使用方法:
1.在过氧化物酶的检测完成以后,TBS 或PBS充分洗涤,一般 5 分钟×4 次。
2.按 1ml 蒸馏水加显色剂A,B,C 各 50ul,混匀。加至标本上。一般显色10-30分钟。
若无背景出现则可继续显色。
3.蒸馏水充分洗涤以终止反应。必要时苏木素复染 30-60 秒左右,水洗。
4.脱水,透明,中性树胶封片,显微镜观察 - DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒-棕黄色yb-5248R phospho-CDK7 (Thr170)磷酸化周期素依赖性激酶7抗体 浓度1mg/ml
yb-5249R Phospho-CDK9 (Thr29)磷酸化周期素依赖性激酶9抗体 浓度1mg/ml
yb-5250R phospho-CHEK1 (Ser280)磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体 浓度1mg/ml
yb-5251R phospho-CHEK1(Ser317)磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体 浓度1mg/ml
yb-5253R phospho-CDKN2A (Ser140)磷酸化抑癌基因p16抗体 浓度1mg/ml
yb-5254R phospho-CDKN2A (Ser152)磷酸化抑癌基因p16抗体 浓度1mg/ml
yb-5255R phospho-CDKN2A (Ser8)磷酸化抑癌基因p16抗体 浓度1mg/ml
yb-5256R phospho-CREB-1(Ser129)磷酸化CREB-1抗体 浓度1mg/ml
yb-5252R phospho-CSF2RB (Tyr766)磷酸化粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体β抗体 浓度1mg/ml
yb-5263R phospho-CDH2 (Tyr820)磷酸化N-钙粘附分子抗体 浓度1mg/ml
yb-5268R phospho-CDC27 (Thr244)磷酸化后期促进复合蛋白3抗体 浓度1mg/ml
yb-5184R phospho-c-Abl(Tyr283)磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体 浓度1mg/ml
yb-5183R phospho-c-Abl(Thr735)磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体 浓度1mg/ml
yb-15341R C9orf759号染色体开放阅读框75抗体 浓度1mg/ml
yb-0647R CD4CD4抗体 浓度1mg/ml
yb-2347R CD42b血小板糖蛋白GPIb抗体 浓度1mg/ml
yb-4098R CARM1蛋白精氨酸N甲基4抗体 浓度1mg/ml
yb-5285R phospho-CARM1(Ser228)磷酸化蛋白精氨酸N甲基4抗体 浓度1mg/ml
yb-5286R phospho-CDK6 (Tyr13)磷酸化周期素依赖性激酶6抗体 浓度1mg/ml
yb-4072R phospho-CBL2 (Tyr700)磷酸化原癌基因CBL2抗体 浓度1mg/ml
yb-5148R Cdc7细胞分裂周期蛋白7抗体 浓度1mg/ml
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文献和实验性笔在组织周围画圈,然后滴加稀释好的一抗,如果做阴性对照实验,就在对照组的组织上滴加 PBS。加完一抗后于 4 °C湿盒中孵育过夜。(抗体的最佳稀释比应预先通过实验确定,时间控制在 15h 以上)。 PBS 冲洗切片 3 次,每次 3 min,吸水纸擦干切片后滴加辣根过氧化物酶标记二抗 ,37 ℃ 孵育 30 min。 信号检测 PBS 冲洗切片 4 次,每次 3 min,甩去 PBS 液体后吸水纸擦干切片,每张切片滴加新鲜配制的 DAB 显色液,显微镜下观察,阳性信号为棕黄色或棕褐色,时间
底物范围较广,包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3% (W
或细胞中目的抗原表达水平低:可延长DAB显色时间或延长二抗孵育时间。 (3)试剂超过有效使用期:及时更换试剂。 (4)操作中,滴加试剂时缓冲液未沥干,致使试剂稀释:可每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液(但防止切片干燥)。 (5) 蛋白封闭过度:封闭时间不要超过 2h。 Q3:为什么出现高背景染色,怎么办? (1)一抗浓度过高:对抗体进行滴定以确定获得特异性反应的最佳浓度。 (2)显色过度:缩短显色试剂 DAB 孵育时间。 (3)洗涤不充分:适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间。 (4)封闭
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