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- 2025年07月09日
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上海乔羽生物科技有限公司
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25支/包,20包/箱
Corning,50ml离心管（带托架）,无菌包装数量：库存
货号:QY-EF430828
规格：25支/包,20包/箱
品牌：美国/corning
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文献和实验今天霸霸带大家学习细胞转染的两种方法：脂质体法与磷酸钙沉淀法。实验原理外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。这里以脂质体介导法为例说明。脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞。利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。脂质体法实验操作☞ 材料准备1. 试剂：293
1.塑料离心管：62.刻度离心管：13. 滴管：长： 1 吸酚：氯仿混合液中： 1 吸乙醇短(钝口) ： 1吸DNA水溶液4.细玻棒：15.移液管：16.微量取样器17.手套：1副8.离心机9.紫外分光光度计10.37℃水浴，50℃水浴11.组织捣碎器12.电泳仪及电泳槽试剂1.裂解缓冲液：50mmol/l Tris—Hcl pH7.420mmol/lEDTA、0.5%SDS100mmol/l NaCl配法： 1mol/l Tris—HCl pH7.4 50ml 20%SDS 25ml 2mol
.病毒纯化至少需要30瓶75cm2方瓶细胞。 3、CsCl连续梯度离心纯化：50ml离心管中称量4.4g CsCl,加入8ml病毒裂解上清液，混匀，体积约为10ml.转移至12ml超速离心管（用于SW41转头）中，覆盖约2ml矿物油。平衡后，10℃下32000 rpm离心18-24hr,用注射器抽吸离心出的病毒带。 （也可CsCl不连续梯度离心：20ml超速离心管中缓慢加入8ml CsCl 1.4 （53 g + 87 mL 10 mM Tris-HCl,pH=7.9），上面小心加入6 mL
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