Animal Tissue Direct PCR Kit

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒产品描述

动物组织直接PCR试剂盒(Animal Tissue Direct PCR Kit)可直接扩增不同大小动物DNA片段，适应性广、稳定性强。试剂盒中采用独特的裂解缓冲液体系，可以简便快速的裂解多种动物细胞与组织样品，如内脏、肌肉、鼠尾、鼠耳、鱼鳍等，并释放出基因组DNA。整个过程不需要除去蛋白、RNA 及其它次生代谢物，也无需有机溶剂抽提，即可得到质量稳定的基因组 DNA，无需后续纯化步骤即可直接用于 PCR反应。

试剂盒中提供的 2×Tissue Master Mix 具有很强的扩增兼容性，能直接以待测样品裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂为 2×PCR 反应混合物，包含Tissue Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 反应增强剂、优化剂和稳定剂。与直接裂解液配合使用能够快速简便地对样品进行检测，并具有灵敏度高、兼容性强、特异性强、稳定性好等特点。

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

10126ES50（50T）

10126ES70（200T）

10126-A

2 × Tissue Master Mix*

550 μl

2.2ml

10126-B

Protease

220 μl

880 μl

10126-C

Buffer AL

6 ml

24 ml

*2 × Tissue Master Mix中包含Tissue Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 反应增强剂、优化剂和稳定剂。

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。

本试剂盒的 2×Tissue Master Mix保存在-20℃。Protease 溶液具有独特配方，常温保存（25℃）可长期具有活性；在 4℃保存，其活性和稳定性会更好，因此建议将其置于在 4℃保存。Buffer AL 在常温干燥条件下，可保存 12 个月，如需保存更长时间可置于 4℃。

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒注意事项

1) 样品应避免反复冻融，否则会导致作为PCR模板的DNA片段较小，影响PCR效率。

2) 建议设立阳性及阴性对照反应。阳性对照可用50ng纯化的动物DNA为模板，阴性反应以ddH2O为模板，引物可采用以前成功扩增的引物。

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒操作方法

1. 取 5-10mg 动物材料，置于离心管中。尽量剪碎动物材料，以使之后的酶解反应容易进行。

2. 向离心管中加入 100μl Buffer AL，涡旋混匀。

3. 向混合液中加入 4μl Protease，涡旋混匀。

4. 65℃孵育 10-30min，然后 95℃处理 5min。

注意： 65℃孵育，一般只需 10min 即可满足多数 PCR 需求。若需要的 DNA 量较大或样品较难酶解，可以将时间延长至 30min。组织块不需完全酶解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。

5. 12,000 rpm (~13,400×g )离心 5min。

6. 转移上清至新的离心管，4℃或-20℃放置备用或直接用于 PCR 扩增。

注意：用于后续 PCR 检测时，模板量占 PCR 体系的 1-10%之间最佳，不能超过 20%。如 50μl 的 PCR 体系中，加入 0.5-5μl 裂解液即可，但不能超过 10μl。

7. PCR反应体系配制

配置好反应体系后，短暂涡旋充分混匀并瞬时离心，将所有试剂收集到管底。

ddH2O

Up to 20μl

2 × Tissue Master Mix

10μl

正向引物（10μM）

0.5μl

反向引物（10μM）

0.5μl

模板 DNA

1μl



8. PCR反应条件设置：

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

3min

1

变性

94℃

30sec

25-35 循环

退火a

55℃

30sec

延伸b

72℃

30 sec/kb

彻底延伸

72℃

5min

1

注意：a. PCR 程序中的退火温度需要根据引物的 Tm 值单独设置；

b. 延伸时间需要根据片段的长度来确定。
Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒yb1016 HOPC-os 人少突胶质前体细胞--悬浮生长 Human Oligodendrocyte Precursor Cells-oligospheres 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1017 HO 人少突胶质细胞 Human Oligodendrocytes 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1018 HOPC-f 人少突胶质前体细胞--新鲜 Human Oligodendrocyte Precursor Cells-fresh 10 x 10^6 cells/tube ATCC
yb1019 HOPC-f40 Human Oligodendrocyte Precursor Cells-fresh 40 x 10^6 cells/tube ATCC
yb1020 HOPC-f80 Human Oligodendrocyte Precursor Cells-fresh 80 x 10^6 cells/tube ATCC
yb1021 HOPC-f20 Human Oligodendrocyte Precursor Cells-fresh 20 x 10^6 cells/tube ATCC
yb1022 HSC 人雪旺细胞 Human Schwann Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1023 HPC 人神经束膜细胞 Human Perineurial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1024 HA 人星形胶质细胞 Human Astrocytes 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1025 HA-c 人小脑星形胶质细胞 Human Astrocytes-cerebellar 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1026 HA-sp 人脊髓星形胶质细胞 Human Astrocytes-spinal cord 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1027 HA-h 人海马星形胶质细胞 Human Astrocytes-hippocampal 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1028 HA-bs 人星形胶质细胞--脑干 Human Astrocytes-brain stem 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1029 HA-mb 人星形胶质细胞 - 中脑 Human Astrocytes - middle brain 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1030 HRA 人类视网膜星形胶质细胞 Human Retinal Astrocytes 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1031 HM 人小神经胶质细胞 Human Microglia 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1032 ATCC
yb1033 真皮细胞系统 ATCC
yb1034 HDMEC 人真皮微血管内皮细胞 Human Dermal Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1035 HDLEC 人真皮淋巴管内皮细胞 Human Dermal Lymphatic Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1036 HDMEC-a 人真皮微血管内皮细胞-成人 Human Dermal Microvascular Endothelial Cells-adult 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1037 HDVSMC "人真皮血管平滑肌细胞-新生儿

" Human Dermal Vascular Smooth Muscle Cells-neonate 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1038 HEK-n 人表皮角质细胞--新生 Human Epidermal Keratinocytes-neonatal 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1039 HEK-a 人表皮角质细胞--成人 Human Epidermal Keratinocytes-adult 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1040 HKf 人表皮角质细胞--胎儿 Human Keratinocytes-fetal 5 x 10^5 cells/vial ATCC