人纤维环细胞总RNA

细胞总RNA的提取

，000g，10min）。其中如果加入等体积异丙醇后，置于试管架上用PE手套密封后，放于4℃冰箱中，沉淀30min效果更好。 5. 去上清，沉淀加入75％乙醇1ml，漩涡振荡30s，离心（4℃，7,500g，5min）。 6. 小心去上清，管内沉淀在超净台中鼓风静置干燥3-5min。最好是用枪头吸取上清，尽量除去。 7. 加入20ul DEPC水溶解，分装5ul/管，-70℃冰箱保存。 8. 细胞总RNA的鉴定：0.9-1.2％琼脂糖电泳鉴定细胞总RNA，观察出现条带及各条

真核细胞总RNA的制备

从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚（dT）纤维素选择分离mRNA，cDNA合成及体外翻译等实验的成败，在很大程度上决定于RNA的质量。 RNA分离的最关键因素是尽量减少RNA酶的污染。 快速一步法提取总RNA 组织及有核细胞在匀浆过程中被变性液破膜、溶解，变性剂抑制RNA酶的活性，并使蛋白质变性及与核酸分离。经酸酚/氯

组织和细胞总RNA提取（TRIzol法）

（二）操作步骤 1 ． 样品处理： （１）培养细胞：收获细胞 1-5×10 7 ，移入 1.5ml 离心管 中，加入 1ml Trizol ，混匀，室温静置 5min 。 （２）组织：取 50-100mg 组织（新鲜或 -70 ℃ 及液氮中保存的组织均可）置 1.5ml 离心管 中，加入 1ml Trizol 充分匀浆，室温静置５ min 。 2 ．加入 0.2ml 氯仿，振荡 15s ，静置 2min 。 3 ．