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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件：
密封干燥保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Phleomycin (20mg/ml in solution)
- 库存：
1000
- 供应商：
钰博生物
Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素产品描述
Phleomycin，中文名腐草霉素，由Streptomyces verticillus（轮枝链霉菌）的突变株产生的一种糖肽抗生素，属于博来霉素(bleomycin)家族。抑菌机制在于腐草霉素可结合并插入DNA，从而破坏其双螺旋结构的完整性。腐草霉素对大多数细菌、真菌、酵母、植物细胞和哺乳动物细胞都有活性，尤其适用于对ZeocinTM敏感性低的细胞，如酵母菌和丝状真菌。
腐草霉素是分子遗传学研究中的选择性抗生素之一，可用于筛选携带Sh ble基因的转染细胞。Sh ble基因来源于Streptoalloteichus hindustanus，其可编码一种14kDa的蛋白，该蛋白可与腐草霉素强烈结合从而抑制其切割DNA链的活性。腐草霉素是由多种结构类似物构成的复合物，这些复合物仅仅在末端胺基有所差异。另外，因属于铜离子螯合的复合物，溶液呈蓝色。
本品以20mg/ml的无菌溶液形式提供，可直接用于细胞培养，在0.1-50μg/ml浓度范围内，腐草霉素可以抑制大多数好氧细胞的生长。
产品性质
CAS号（CAS NO.）
11006-33-0
分子式（Formula）
C55H85O21N20S2Cu•HCl
分子量（Molecular weight）
1525
纯度（Purity）
>90%(HLPC)
结构式（Structure）
Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素
运输与保存方法
冰袋运输。
4°C或-20°C保存。4°C稳定保存12个月，-20°C可稳定保存18个月。避免反复冻融。
操作方法
【注1】细胞对腐草霉素的敏感性受pH值影响，如pH值越高，敏感性越高；另外，对于高渗透压培养基如原生质体再生用的培养基，腐草霉素的活性会明显降低2-3倍。因此也可能通过使用低盐培养基来降低腐草霉素使用量。
【注2】使用前需将低温存放的腐草霉素置于室温回温，之后低速充分混匀。
1大肠杆菌
携带bleomycin抗性基因如Sh ble，Tn5的质粒，一旦转化进入大肠杆菌受体菌如HB101， DH5a， MC1061，赋予其腐草霉素抗性。
腐草霉素抗性的转化子可以在添加5 μg/ml Phleomycin的低盐LB琼脂培养基（Yeast extract 5g/L, Tryptone 10g/L, NaCl 5g/L, Agar 15 g/L, pH 7.5）中进行筛选。加有腐草霉素的平板可于4℃稳定保存1个月。
2酵母菌
酿酒酵母的腐草霉素抗性转化子可在添加10 μg/ml Phleomycin的YEPD培养基中进行筛选。
操作步骤：按常规方法进行酵母细胞转化，一旦DNA进入细胞后，用YEPD培养基稀释细胞并置于摇床上培养6h或过夜，使其抗性性状得以表达。之后将细胞冰浴1h并涂布培养在添加10 μg/ml Phleomycin的YEPD（pH 7.0）固体培养基上。
3真菌
根据转化子对Phleomycin 的敏感性不同，在添加有10-50 μg/ml腐草霉素的再生培养基内进行筛选。先将细胞在4℃孵育过夜然后置于生长温度培养，可提高其对抗生素的敏感性。
4 植物细胞
根据植物类型不同，选择5-25 μg/ml Phleomycin进行转化子筛选。
5 哺乳动物细胞
5-50 μg/ml Phleomycin，推荐先通过建立灭杀曲线来确定最佳浓度。与G418做比较，可能需要更长的时间来杀死细胞或者使细胞从平板上脱落，尤其当细胞处于高密度的情况。
依细胞系不同，通常需要5~21天来挑选具腐草霉素抗性的稳定转染细胞。
Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素注意事项
1）腐草霉素对浓酸较为敏感，但可短时间暴露于稀酸中。使用前将本品回温至室温，并轻轻混匀。
2）腐草霉素有毒，避免直接接触皮肤，不可吞服。酸性或碱性pH，或次磷酸钠中会即刻失效。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素yb-222 人人胚肾细胞
yb-223 人胚肾上皮包装细胞
yb-224 人胚肾上皮包装细胞
yb-225 人肾上腺腺瘤细胞
yb-226 人胚肾上皮细胞
yb-227 人肾癌细胞
yb-228 人胚肾上皮细胞
yb-229 人肾小管近段上皮细胞
yb-230 人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)
yb-231 人胚肾细胞
yb-232 人胚肾二倍体细胞
yb-233 人肾癌细胞系(769-P)
yb-234 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞
yb-235 人肾上腺皮质腺癌细胞
yb-236 人肾癌细胞系
yb-237 人肾癌细胞系
yb-238 人肾癌细胞
yb-239 人肾上皮细胞
yb-240 人肾癌Wilms细胞
yb-241 Asp2人胚胎肾细胞转化细胞
yb-242 人肾癌细胞
yb-243 人膀胱癌细胞
yb-244 人膀胱癌细胞
yb-245 人膀胱移行细胞癌细胞
yb-246 人膀胱鳞癌细胞
yb-247 人膀胱癌细胞
yb-248 人胆管癌细胞
yb-249 人胆管癌细胞
yb-250 人乳腺癌细胞
yb-251 人乳腺癌细胞
yb-252 人乳腺癌细胞
Phleomycin，中文名腐草霉素，由Streptomyces verticillus（轮枝链霉菌）的突变株产生的一种糖肽抗生素，属于博来霉素(bleomycin)家族。抑菌机制在于腐草霉素可结合并插入DNA，从而破坏其双螺旋结构的完整性。腐草霉素对大多数细菌、真菌、酵母、植物细胞和哺乳动物细胞都有活性，尤其适用于对ZeocinTM敏感性低的细胞，如酵母菌和丝状真菌。
腐草霉素是分子遗传学研究中的选择性抗生素之一，可用于筛选携带Sh ble基因的转染细胞。Sh ble基因来源于Streptoalloteichus hindustanus，其可编码一种14kDa的蛋白，该蛋白可与腐草霉素强烈结合从而抑制其切割DNA链的活性。腐草霉素是由多种结构类似物构成的复合物，这些复合物仅仅在末端胺基有所差异。另外，因属于铜离子螯合的复合物，溶液呈蓝色。
本品以20mg/ml的无菌溶液形式提供，可直接用于细胞培养，在0.1-50μg/ml浓度范围内，腐草霉素可以抑制大多数好氧细胞的生长。
产品性质
CAS号（CAS NO.）
11006-33-0
分子式（Formula）
C55H85O21N20S2Cu•HCl
分子量（Molecular weight）
1525
纯度（Purity）
>90%(HLPC)
结构式（Structure）
Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素
运输与保存方法
冰袋运输。
4°C或-20°C保存。4°C稳定保存12个月，-20°C可稳定保存18个月。避免反复冻融。
操作方法
【注1】细胞对腐草霉素的敏感性受pH值影响，如pH值越高，敏感性越高；另外，对于高渗透压培养基如原生质体再生用的培养基，腐草霉素的活性会明显降低2-3倍。因此也可能通过使用低盐培养基来降低腐草霉素使用量。
【注2】使用前需将低温存放的腐草霉素置于室温回温，之后低速充分混匀。
1大肠杆菌
携带bleomycin抗性基因如Sh ble，Tn5的质粒，一旦转化进入大肠杆菌受体菌如HB101， DH5a， MC1061，赋予其腐草霉素抗性。
腐草霉素抗性的转化子可以在添加5 μg/ml Phleomycin的低盐LB琼脂培养基（Yeast extract 5g/L, Tryptone 10g/L, NaCl 5g/L, Agar 15 g/L, pH 7.5）中进行筛选。加有腐草霉素的平板可于4℃稳定保存1个月。
2酵母菌
酿酒酵母的腐草霉素抗性转化子可在添加10 μg/ml Phleomycin的YEPD培养基中进行筛选。
操作步骤：按常规方法进行酵母细胞转化，一旦DNA进入细胞后，用YEPD培养基稀释细胞并置于摇床上培养6h或过夜，使其抗性性状得以表达。之后将细胞冰浴1h并涂布培养在添加10 μg/ml Phleomycin的YEPD（pH 7.0）固体培养基上。
3真菌
根据转化子对Phleomycin 的敏感性不同，在添加有10-50 μg/ml腐草霉素的再生培养基内进行筛选。先将细胞在4℃孵育过夜然后置于生长温度培养，可提高其对抗生素的敏感性。
4 植物细胞
根据植物类型不同，选择5-25 μg/ml Phleomycin进行转化子筛选。
5 哺乳动物细胞
5-50 μg/ml Phleomycin，推荐先通过建立灭杀曲线来确定最佳浓度。与G418做比较，可能需要更长的时间来杀死细胞或者使细胞从平板上脱落，尤其当细胞处于高密度的情况。
依细胞系不同，通常需要5~21天来挑选具腐草霉素抗性的稳定转染细胞。
Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素注意事项
1）腐草霉素对浓酸较为敏感，但可短时间暴露于稀酸中。使用前将本品回温至室温，并轻轻混匀。
2）腐草霉素有毒，避免直接接触皮肤，不可吞服。酸性或碱性pH，或次磷酸钠中会即刻失效。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素yb-222 人人胚肾细胞
yb-223 人胚肾上皮包装细胞
yb-224 人胚肾上皮包装细胞
yb-225 人肾上腺腺瘤细胞
yb-226 人胚肾上皮细胞
yb-227 人肾癌细胞
yb-228 人胚肾上皮细胞
yb-229 人肾小管近段上皮细胞
yb-230 人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)
yb-231 人胚肾细胞
yb-232 人胚肾二倍体细胞
yb-233 人肾癌细胞系(769-P)
yb-234 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞
yb-235 人肾上腺皮质腺癌细胞
yb-236 人肾癌细胞系
yb-237 人肾癌细胞系
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yb-239 人肾上皮细胞
yb-240 人肾癌Wilms细胞
yb-241 Asp2人胚胎肾细胞转化细胞
yb-242 人肾癌细胞
yb-243 人膀胱癌细胞
yb-244 人膀胱癌细胞
yb-245 人膀胱移行细胞癌细胞
yb-246 人膀胱鳞癌细胞
yb-247 人膀胱癌细胞
yb-248 人胆管癌细胞
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