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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海远慕生物科技有限公司
- 检测范围:
科研
- 检测方法:
酶联检测
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
小鼠
- 规格:
48T/96T
搜索名:蛋白磷酸酶(PP)ELISA检测试剂盒 咨询热线:18321664727
ELISA试剂盒上海远慕生物科技有限公司长期提供酶免Elisa试剂盒、ELISA检测试剂盒、免疫组化试剂盒、人Elisa试剂盒、大小鼠Elisa试剂盒、抗体抗原,价格实惠,质量有保证,信誉第一。凡购买目录本公司ELISA检测试剂盒可免费提供代测服务,欢迎来电订购!
蛋白磷酸酶,PP ELISAkit
YM-PS2983
Elisa试剂盒规格统一:48T和96T
elisa贮存6个月的条件:2-8℃
底物请避光保存;Elisa试剂盒不同批号组分不得混用,从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。
蛋白磷酸酶,PP ELISAkitELISA的比色测定由酶标仪进行。有的同行可能会认为,既然由酶标仪进行,那么此时便可以万事大吉了,其实不然,因为当代较为先进的酶标仪,均有较多的功能,使用不当,会得到令人难以理解的实验结果。如使用酶标仪比色测定后,有许多的阴性测定孑L的吸光度值为负数;或测定假阳性率大大增加等等。这主要是没有正确地理解和使用酶标仪所致。
此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加1滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为五色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
蛋白磷酸酶,PP ELISAkitELISA试剂盒细胞裂解液裂解细胞之前,必须根据以下方向的测定。
1。贴壁细胞应分离胰蛋白酶和离心后收集(悬浮细胞将离心收集直接)。
2。洗细胞三次冷PBS。
3。悬浮细胞在PBS(1×)和细胞受超声处理4次(或≤冷冻细胞
-20°C。用温和的混融细胞。3次重复冻结/解冻周期。)
4。在1500×g离心10分钟在2到8摄氏度去除细胞碎片。
细胞培养上清和其他生物液体在1000×g离心20分钟去除样品
颗粒和即刻检测或者商店样品在-20°C或稀释后使用80oC。避免重复
冻结/解冻循环。
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文献和实验参与免疫细胞激活信号转导的蛋白磷酸酶 蛋白磷酸酶的作用和蛋白激酶相反。根据脱磷酸化的氨基酸残基的不同,蛋白磷酸酶也分成蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP,PTPase)和丝氨酸/苏氨酸磷酸酶。参与淋巴细胞激活的蛋白磷酸酶主要有: ①CD45:该分子胞内段的两个结构域发挥PTP的作用,因而CD45属于受体型蛋白酪氨酸磷酸酶,在对抗瓢kPTK的作用和启动淋巴细胞信号转导中发挥关键作用; ②钙调磷酸酶
蛋白激酶和蛋白磷酸酶 信号转导中信号蛋白的磷酸化和脱磷酸化十分重要,分别由蛋白激酶和磷酸酶促成。蛋白质分子上能够发生磷酸化的氨基酸残基主要有两类:酪氨酸以及丝氨酸和苏氨酸。通常,能使酪氨酸残基发生磷酸化的蛋白酪氨酸激酶(PTK),在信号转导的上游发挥作用;而引起丝、苏氨酸磷酸化的激酶,如丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),较多地在信号转导的下游发挥作用,直接参与转录因子的活化。 参与T细胞激活的主要蛋白激酶和蛋白磷酸酶
,保证了实验的稳定性。②采用较短的作用时间,可避免细胞质内其它蛋白质及核内出现阳性假象,保证了实验的可靠性。③以姬姆萨染色的巨噬细胞为观察对象,细胞核 及细胞轮廓以及细胞质中反应沉淀的颗粒都比较清晰,有助于深入理解细胞吞噬作用、浴酶体功能和分布以及溶酶体标志酶——酸性磷酸酶的性质。 三、实验用品 (一)材料小鼠腹腔液涂片(重点观察巨噬细胞) (二)器材高压灭菌锅、冰箱、注射器、载玻片、盖玻片及温箱。 (三)试剂 1. 10%中性福尔马林(pH6.8~7.2) 甲醛
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