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- 2025年10月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海古朵生物有限公司
- 检测范围：
科研
- 检测方法：
酶联检测
- 适应物种：
小鼠
- 规格：
48T/96T
血浆α颗粒膜蛋白ELISA
货号：GD-NB3068
规格:48T/96T
运输条件:2-8℃低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
血浆α颗粒膜蛋白ELISA洗涤方法:
1. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制)，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl /每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止)。
7.每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
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血浆α颗粒膜蛋白ELISA由上海古朵专业销售，产品质量有保证，公司提供产品储存条件、 用途、注意事项及完善的售后服务，欢迎广大客户来电咨询！
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文献和实验（ALIX）、肿瘤易感基因 101 蛋白（TSG101）、热休克蛋白（HSP70、HSP90），以及细胞分泌的特异性蛋白。其中 CD9、CD63、HSP70、TSG101 是外泌体常用的鉴定蛋白。 流式细胞术检测：外泌体可以先进行荧光标记，再通过流式细胞仪检测外泌体表面标记蛋白。但是传统的流式细胞仪检测样本的颗粒大小是 300-500 nm，而外泌体直接都在 300 nm 以下，因此，可能大量的外泌体检测不到，造成分析不太准确。 ELISA 检测 ：根据外泌体的表面标志物，如 CD9、CD63 进行
治”的颗粒——待测物复合体所散发的荧光，从而测定待测物的数量。详细原理介绍：每个CBA微球大小一致，具有特定的荧光强度，包被有适用于特定分析（如其它抗体或者可溶性蛋白）的特异性捕获抗体（Capture Antibody），提供了类似ELISA孔板的捕获表面。当微球和待测样品溶液混合后，微球上的特异性抗体就与样品（血清、血浆或者细胞培养液）中相应的抗原或蛋白结合，然后加入荧光标记的检测抗体，就会形成“三明治”夹心复合物。最后通过流式细胞仪对特异性目的蛋白进行检测。CBA的每种微球携带有不同强度的红色
) AFM from Shao, H., et al. 2018. Chem Rev. 外泌体相关蛋白鉴定：外泌体蛋白的鉴定和定量不仅有利于鉴定外泌体的来源及其内容物、而且对于外泌体生理病理标志物的鉴定也非常重要。传统的方法包括 WB、ELISA、质谱；这些年针对外泌体的研究也出现了一些新方法，包括小颗粒流式细胞仪、微核磁共振、Nanoplasmonic Exosome (nPLEX) Sensor、Integrated Magnetic-Electrochemical Exosome(iMEX
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