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小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1ELISA

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  • 2025年11月05日
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    • 供应商

      上海古朵生物有限公司

    • 检测范围

      科研

    • 检测方法

      酶联检测

    • 适应物种

      小鼠

    • 规格

      48T/96T

    小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA检测试剂盒详情介绍:
    小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1ELISA
    货号:GD-NB6000
    规格:48T/96T
    运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
    待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
    小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1ELISA洗涤方法:
    1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
    2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
    实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。
    1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
    2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
    3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
    4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
    5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
    6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
    7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
    8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
    9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
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      者,更应高度警惕。肝癌患者血清AFP含量变化的速率和程度与肿瘤组织分化程度高低有一定相关性,分化程度较高的肿瘤AFP含量常大于200μg/L. 检测AFP的免疫学方法主要有免疫扩散电泳(火箭电泳)、γ-射线计数125I标记检测法和定性、定量酶免疫方法。用不同的植物凝集素可以检测和鉴别不同组织来源的AFP的异质体。如用小扁豆凝集素(LCA)亲和交叉免疫电泳自显影法,可以检测LCA结合AFP异质体。 血清AFP含量的检测对其它肿瘤的监测亦有重要临床价值。如睾丸癌、畸胎瘤、胃癌、胰腺

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