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过氧化物酶体增殖物激活受体αELISA

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  • 2025年10月28日
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    • 供应商

      上海古朵生物有限公司

    • 检测范围

      科研

    • 检测方法

      酶联检测

    • 适应物种

      小鼠

    • 规格

      48T/96T

    小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒详情介绍:
    过氧化物酶体增殖物激活受体αELISA
    货号:GD-NB2980
    规格:48T/96T
    运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
    待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
    过氧化物酶体增殖物激活受体αELISA操作步骤:
    1)取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。
    2)分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6个浓度)、空白孔、待测样品组。
    3)标准品的稀释:准备小试管6 只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
    注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
    4)加样:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入50ul的蒸馏水;其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
    5)温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
    6)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒弃去,如此重复5 次,拍干。
    7)加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
    8)温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
    9)洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15-30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸彻底拍干。
    10)显色:各孔加入显色剂A液50ul后,再加入显色剂B液50ul。
    11)终止:25-37℃下避光反应10-15分钟,加入50ul终止液。
    12)读板:在450nm波长读取各孔的OD值。
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