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- 2025年10月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海古朵生物有限公司
- 检测范围：
科研
- 检测方法：
酶联检测
- 适应物种：
小鼠
- 规格：
48T/96T
信号转导分子7ELISA
货号：GD-NB2743
规格:48T/96T
运输条件:2-8℃低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
信号转导分子7ELISA操作步骤：
1）取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。
2）分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。
3）标准品的稀释：准备小试管6 只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
4）加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
5）温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒弃去，如此重复5 次，拍干。
7）加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。
8）温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9）洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸彻底拍干。
10）显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。
11）终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。
12）读板：在450nm波长读取各孔的OD值。
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文献和实验beiyanyijiu 首先很感谢丁香园能开通这个版块，让有兴趣的人能聚在一起相互交流 我想请教一下各位 “基于化学小分子的信号转导通路研究” ，这方面目前在国内似乎是个空白 不知道有没有人了解一些国际的进展，或者影响比较高的综述，亦或者那些人在这方面比较有造诣 真心请教，谢谢 doge 首先本人非高手，以下仅供参考。 这个有点太special了，实际上化学小分子
CD45 分子参与启动信号转导 然而事实上，上述过程并不产生。Src分子有两个酪氨酸残基位点，一个位于催化结构域即SHl内394位置处，是激酶显示活性的关键部位，也是相互磷酸化中Src分子间磷酸根转移的靶目标。另一个酪氨酸残基在Sre分子C端505位置，发挥抑制作用。在未激活的T细胞中组成性表达一种称为Csk的蛋白酪氨酸激酶(图9―1)。Csk指C端Src激酶(C―terminal Srckinase)，专以Y505为靶目标，使其一直处于磷酸化状态(成为
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