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上海钰博
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上皮样
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干冰运输
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贴壁生长
淋巴细胞分离液（Lymphocyte Separation Medium，简称LSM）是一种无菌的即用型分离液，基于Böyum的Ficoll-甲泛影钠溶液做过一些改良，使得操作简单快速且分离效率更高。每100 ml淋巴细胞分离液中含有6.2 g 聚蔗糖（Ficoll）和9.4 g 泛影酸钠，20℃下的密度为1.0770-1.0800 g/ml。不仅适用于外周血淋巴细胞，也可分离其他组织来源的淋巴细胞，包括脐带血和骨髓细胞。
Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴细胞分离液 1.077工作原理
去纤维蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释，加在分离液上层，之后低速离心30 min。在离心过程中，差速迁移使其最终形成几个细胞分层。聚集在管底的颗粒主要是红细胞和多形核粒细胞，通过梯度迁移至管底。根据其密度的大小，淋巴细胞和其他单个核细胞如单核细胞，以及血小板分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收，并通过进一步清洗来去除血小板，LSM和血浆。
运输与保存方法
室温运输。
室温（15-30 °C）避光保存。 若溶液变浑浊，呈现出不同的黄色或可能有受污染迹象，不可再使用。
Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴细胞分离液 1.077操作方法
注：此操作流程适用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人血。对于其他物种或者其他组织的血液，可能需要对此步骤做出一定的改进。
1）轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合；
2）无菌条件转移3 ml LSM到15 ml离心管中；
3）用2 ml 生理盐水混合2 ml去纤维蛋白血液或肝素化血液；
4）小心将稀释血液加入3 ml LSM（室温即可）的上层，使得在血液和LSM间形成一个明显的分层。不要将稀释血液混入LSM中；
5）室温下400g离心15-30min，离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞，同时可以在LSM上形成一层单核-淋巴细胞分层，如下图所示（从上到下，依次分为血浆层-淋巴细胞层-LSM层-RBC颗粒）；
6）吸出淋巴细胞层上方2-3 mm内的血浆；
7）吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM层，并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中，室温离心10 min，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞的范围，例如160 – 260 g（清洗去除LSM和降低血小板含量）；
8）用平衡盐缓冲液再清洗细胞一次，最后取适当的培养基重悬细胞。
注意事项
1）稀释去纤维蛋白血液或肝素化血液用的生理盐水为无菌液体；
2）为保持淋巴细胞的活性，应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层，包括淋巴细胞和单核细胞。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴细胞分离液 1.077yb-axbz-202 C3H小鼠骨肉瘤 LM8 规格25毫升/株.
yb-axbz-203 大鼠骨肉瘤 VMR106 规格25毫升/株.
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编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
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yb-axbz-207 大鼠皮层神经元细胞 RN-c 规格25毫升/株.
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yb-axbz-209 小鼠小胶质瘤细胞 Bv-2 规格25毫升/株.
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yb-axbz-211 大鼠脑膜细胞 RMC 规格25毫升/株.
yb-axbz-212 转基因细胞 3T3/Fas/com 规格25毫升/株.
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yb-axbz-221 兔主动脉平滑肌细胞 SMC 规格25毫升/株.
yb-axbz-222 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素) AtT-20 规格25毫升/株.
yb-axbz-223 小鼠骨髓瘤细胞 Fox-NY 规格25毫升/株.
yb-axbz-224 兔主动脉平滑肌细胞 CCC-SMC-1 规格25毫升/株.
yb-axbz-225 兔主动脉平滑肌细胞 CCC-SMC-2 规格25毫升/株.
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yb-axbz-227 小鼠原B细胞株 BaF3 规格25毫升/株.
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yb-axbz-231 小鼠胚胎成纤维细胞 3T6-Swiss albino 规格25毫升/株.
yb-axbz-232 小鼠成纤维细胞 C3H 10T1/2 2A6 规格25毫升/株.
yb-axbz-233 小鼠树突状细胞肉瘤细胞 DCS 规格25毫升/株.
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文献和实验人外周血单个核细胞: 原理：人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell, PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形状和比重与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞比重较大，为1.092左右，而淋巴细胞和单个核细胞比重为1.075左右。利用密度在1.077±0.001g/L之间近于等渗的淋巴细胞分离液作密度梯度离心时，各种血液成分将按密度梯度重新分布聚集。血浆和血小板由于密度较低, 故悬浮于分层液的上部；红细胞与粒细胞由于密度较大, 故沉于分层液的底部；PBMC密度稍低于分层
Adult cattle serum as supplemental nutrient in lymphocyte cultures for chromosomes studies
: Mon Feb 02 2009 Date Modified: Mon Feb 02 2009 Abstract: The author has made a search for an alternate nutrient (serum supplement) source for lymphocyte cultures. This report describes the procedure for separation
以上，收获率可达80～90％，活细胞百分率在95％以上。(三) 试剂和材料: 比重1.077±0.001的聚蔗糖-泛影葡胺(商品名为淋巴细胞分离液)。 Hank's液(无Ca２＋、Mg２＋) 10％小牛血清RPMI1640 0.2％台酚兰染色液，用生理盐水或等渗的PBS配制。 肝素用Hank's液或生理盐水稀释成500单位／ml，牽9凝人外周血肝素用量约为50单位／1毫升血。 短中管、毛细滴管、1毫升和10毫升刻度吸管。 无菌干燥注射器针头。 碘酒，75％酒精，无菌棉球，镊子，橡皮止血
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