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英文名称:
规格:1ML
标准鸡血清产品说明与用途:
标准鸡血清使用操作规程:
目的:建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围:本操作规程适用于营养琼产品脂培养基的配制使用。
职责:质检室质检员负责本操作规程的执行,质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
标准鸡血清实验内容:
1.仪器与试剂:
1.1.托盘天平、消毒锅、电实验冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
1.2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1.称取营养琼脂17克,于1000ml三角瓶内,加入500ml纯化水,充分搅拌后,塞上棉塞,用牛皮纸包好,扎紧瓶口。
2.2.置消毒锅内,于115℃高压灭菌30分钟,取出放置至室温后,放入实验冰箱,备用(实验冰箱温度控制在1-4℃)。
2.3.使用时从实验冰箱取出,放置室温后,置水浴中加热,使融,融化后取出,放置约45℃时使用。
2.4.使用时,用75%乙醇擦瓶子外围,打开牛皮纸包扎外壳,在火焰附近慢慢旋下棉塞,左手拿培养皿,右手拿三角瓶,慢慢倾倒至培养皿中,每皿注入约
15ml完毕后,将棉塞在火焰上方烧烤数秒,立马塞入瓶口,包上牛皮纸外层,用线绳扎好,留下次使用。(此瓶培养基只允许使用两次,且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养)。
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文献和实验做过 qPCR 实验的小伙伴都知道,稳定和精确的 qPCR 实验常和 PCR 的扩增效率有关。实验中,为了确保 qPCR 实验结果的准确,建议在实验前通过标准曲线的实验评估 PCR 的扩增效率。做标准曲线实验的时候,建议将标准品进行至少 5 个数量级的梯度稀释,每个梯度稀释液进行 3 次重复,然后将稀释的标准品进行 qPCR 实验,最后根据各样品的浓度(或未知浓度样品的稀释倍数)及相应的 Ct 值绘制标准曲线(图 1)。 图 1. 扩增曲线和标准曲线 其中,slope 是标准曲线的斜率,Eff
zgq8888 求助: 我想做一个QPCR检测肝癌组织及正常组织的一个基因表达,我是用哪个做标准品建立标准曲线;另外关于人的内参NAPDH的引物序列,不同文献不同,我应该怎样选择。谢谢 zjubell 你要做绝对定量还是相对定量? 既然你提取用内参,那应该就是相对定量了 所以不需要标准品做标准曲线。但你需要对你的两对引物进行扩增效率测试 也是10倍稀释,就拿cDNA即可。 如果两个梯度间
,比如: 1.It seems there are many wrong metabolite identifications; 2.How the authors identify the isomers because are no standards described in the manuscrip; 3.Please add information of MS2 and mass error in Table; …… 2.避免审稿小技巧—数据鉴定的标准化 防患于未然,把数据鉴定标准化、明确化和数据化显得尤为重要,在文章中适当呈现,是避免一系列审稿
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