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- HL6015
- 2025年07月15日
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英文名称：
规格：10ml×4
刘荣标氏鞭毛染色液产品说明与用途：用于鞭毛染色
刘荣标氏鞭毛染色液使用操作规程：
目的：建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围：本操作规程适用于营养琼产品脂培养基的配制使用。
职责：质检室质检员负责本操作规程的执行，质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
刘荣标氏鞭毛染色液实验内容：
1．仪器与试剂：
1.1.托盘天平、消毒锅、电实验冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
1.2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1.称取营养琼脂17克，于1000ml三角瓶内，加入500ml纯化水，充分搅拌后，塞上棉塞，用牛皮纸包好，扎紧瓶口。
2.2.置消毒锅内，于115℃高压灭菌30分钟，取出放置至室温后，放入实验冰箱，备用（实验冰箱温度控制在1－4℃）。
2.3.使用时从实验冰箱取出，放置室温后，置水浴中加热，使融，全部融化后取出，放置约45℃时使用。
2.4.使用时，用75%乙醇擦瓶子外围，打开牛皮纸包扎外壳，在火焰附近慢慢旋下棉塞，左手拿培养皿，右手拿三角瓶，慢慢倾倒至培养皿中，每皿注入约
15ml完毕后，将棉塞在火焰上方烧烤数秒，立马塞入瓶口，包上牛皮纸外层，用线绳扎好，留下次使用。（此瓶培养基只允许使用两次，且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养）。
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文献和实验平板，26℃培养24h。试剂配方仍不变，媒染液放置1、2、4、8、16周后进行染色，媒染液染色8 min，银染液染色30～60 s，不需加热。这4种细菌均染色成功，从而证明媒染液可至少放置16周。 2002年谷海瀛发明了一种新的细菌鞭毛镀银染色法。该法将媒染剂分为A、B两种。A液为酸化FeCl3溶液，B液为15%单宁酸，含甲醛1 ml，用时A、B液等量混合，轻微加热，染片40s，再用银染液涂片加热至微冒蒸汽，染色10 s。通过对19个属，34个种，228株细菌进行鞭毛染色
。③镜检：荚膜染成浅红色，细胞呈紫红色 4． 鞭毛染色法 （1）原理： 细菌鞭毛直径为10~12nm，超过了光学显微镜的分辨能力。所以染色时，不仅要使鞭毛染色，还要使一部分染料堆积在鞭毛上，加粗鞭毛的直径以便能观察。鞭毛染色的方法很多，但染色成功的关键一是必须使用新鲜培养、活动活泼的菌体进行染色；二是使用绝对无油的干净玻片，以便菌液流过玻片时能保持自然形态。细菌的运动性，可通过悬滴法制片观察。注意区分布朗运动和细菌本身的运动 （2）操作：染色液配制如下。 甲液：①明矾饱和水溶
%甲醛）0.5 ml 将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟，然后加入福尔马林作防腐剂。 2. 番红染液 与革兰氏染液中番红复染液相同。 六、鞭毛染色液 A液：单宁酸5 g FeCl3 1.5 g 蒸馏水 100 ml 福尔马林（15%）2.0 ml NaOH（1%）1.0 ml 配好后，当日使用，次日效果差，第三日则不宜使用。 B液：AgNO3 2 g 蒸馏水 100 ml 待AgNO3溶解后，取出10 ml 备用，向其余的90 ml AgNO3中
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