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- 哈灵
- HL5078
- 2025年07月05日
企业认证
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英文名称：
规格：20支
ONPG产品说明与用途：
ONPG使用操作规程：
目的：建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围：本操作规程适用于营养琼产品脂培养基的配制使用。
职责：质检室质检员负责本操作规程的执行，质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
ONPG实验内容：
1．仪器与试剂：
1.1.托盘天平、消毒锅、电实验冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
1.2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1.称取营养琼脂17克，于1000ml三角瓶内，加入500ml纯化水，充分搅拌后，塞上棉塞，用牛皮纸包好，扎紧瓶口。
2.2.置消毒锅内，于115℃高压灭菌30分钟，取出放置至室温后，放入实验冰箱，备用（实验冰箱温度控制在1－4℃）。
2.3.使用时从实验冰箱取出，放置室温后，置水浴中加热，使融，全部融化后取出，放置约45℃时使用。
2.4.使用时，用75%乙醇擦瓶子外围，打开牛皮纸包扎外壳，在火焰附近慢慢旋下棉塞，左手拿培养皿，右手拿三角瓶，慢慢倾倒至培养皿中，每皿注入约
15ml完毕后，将棉塞在火焰上方烧烤数秒，立马塞入瓶口，包上牛皮纸外层，用线绳扎好，留下次使用。（此瓶培养基只允许使用两次，且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养）。
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文献和实验成分 邻硝基酚β-D-半乳糖昔（ONPG） 60mg （O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside） 0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.5） 10mL 1%蛋白胨水（PH7.5） 30mL 制法 将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm×75mm试管，每管0.5mL,用橡皮塞塞紧。 试验方法 自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于36±1℃培养1~3h和24h观察
缓冲液： Na2H2PO4 6．9克 溶于40DW中，用5NNOH调PH7．0，再加水到50毫升，冰箱保存．用前若有结晶可稍加温，溶解后再用． ONPG液： 称取ONPG（邻硝基酚--B--D半乳糖苷）80毫克，溶于15毫升D.W中，再加上缓冲液5毫升，放入冰箱中保存．此液不稳定，如出现黄色即不能用． 鉴别： 脑膜炎球菌和乳糖球菌及沙门氏菌属与枸橼酸菌属及亚利桑那氏菌属． 脑膜炎球菌和沙门氏菌属为阳性． 乳球菌，枸橼酸菌属和亚利桑那菌属为阳性．
培养基、糖发酵管、ONPG培养基、半固体琼脂、丙二酸钠培养基、沙门氏菌因子血清：按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。4 检验程序沙门氏菌检验程序如下：5 操作步骤5.1 前增菌取检样25g，加入225mL缓冲蛋白胨水于均质杯内。用均质器以8000~10000r/min打碎1min，于36±1℃培养4h（干蛋品培养18~24h），移取10mL，转种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液（MM）或四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液内，于42℃培养18~24h。同时，另取10mL，转种
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
