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室温
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6个月
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大量
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上海哈灵生物科技有限公司
用途:总蛋白定量的二喹啉甲酸/BCA分析。
BCA蛋白定量试剂盒操作体会:
1. 控制好染色步骤;
2. 组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定溶液可延长或缩短染色时间; 3. 0.2%冰醋酸水溶溶液洗,可使色调清晰鲜艳;
3. 磷钼酸水溶溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制, 肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。
BCA蛋白定量试剂盒产品优势:
哈灵生物供应的提供该产品最新报价及使用说明书、原理、资料下载,同时我们承诺质量保证,提供实验技术支持。如产品有任何产品质量问题,无条件退换(非人为因素造成)。且我司提供的产品实验效果好,节省经费,更有上海客户免费提供送货服务,我司有完整的营销体系,保证了售前、售后问题,让您实验轻松完成。、
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| HLNP0034 | Taq稀释缓冲液 | 100ml | PCR相关 |
| HLNP0040 | 明胶水溶液(2%,PCR级) | 50ml | PCR相关 |
| HLNP0050 | 二磷酸腺苷溶液(AHLDP,1mmol/L) | 10ml | PCR相关 |
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| HLNP0059 | 甜菜碱溶液(10mol/L,PCR级) | 10ml | PCR相关 |
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| HLNR0001 | DEPC处理水(0.1%) | 100ml | RHLNA溶液 |
| HLNR0001 | DEPC处理水(0.1%) | 500ml | RHLNA溶液 |
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| HLNR0009 | EDTA溶液(0.5mol/L,pH8.0,RHLNAse free) | 500ml | RHLNA溶液 |
| HLNR0017 | HBS缓冲液 | 500ml | RHLNA溶液 |
| HLNR0040 | RHLNAse A(10mg/ml) | 1ml | RHLNA溶液 |
| HLNR0040 | RHLNAse A(10mg/ml) | 5ml | RHLNA溶液 |
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文献和实验法是十分常用的蛋白质比色定量方法,很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测,BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性,消除了核酸的干扰,核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下,蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ,Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物,如图1,其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值,并与标准
蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记,同样需首先对蛋白样品进行定量,以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。现今有很多商品化的蛋白定量试剂盒,如BCA定量试剂盒等,操作起来,简便快捷。当然也有不少实验室,还是采用传统的方法进行蛋白定量。现将蛋白定量过程中所遇的一些问题小结一下。Q1: 采用考马斯亮蓝G5-20
对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白)。实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂)抽提总蛋白(或核蛋白)。2. 蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE):将准备好的样品液和预染
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