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大量
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上海哈灵生物科技有限公司
用途:免疫组化封闭液
内源性生物素封闭液操作体会:
1. 控制好染色步骤;
2. 组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定溶液可延长或缩短染色时间; 3. 0.2%冰醋酸水溶溶液洗,可使色调清晰鲜艳;
3. 磷钼酸水溶溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制, 肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。
内源性生物素封闭液产品优势:
哈灵生物供应的内源性生物素封闭液提供该产品最新报价及使用说明书、原理、资料下载,同时我们承诺质量保证,提供实验技术支持。如产品有任何产品质量问题,无条件退换(非人为因素造成)。且我司提供的产品实验效果好,节省经费,更有上海客户免费提供送货服务,我司有完整的营销体系,保证了售前、售后问题,让您实验轻松完成。、
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文献和实验灭活内源性酶及封闭内源性生物素 在生物体组织内均含有一定量的内源性酶和内源性生物素,如富含血细胞的组织标本有大量具有活性的过氧化物酶,肝、脾、肾、脑及胚胎组织中富含生物素。 如采用过氧化物酶检测系统或碱性磷酸酶和NBT/BCIP显色系统进行免疫组织化学染色时.酶的作用是催化底物,使显色剂显色,而组织中的内源性酶同样也能催化底物,使其显色,这就影响免疫组织化学染色的特异性。在使用亲和素试剂的免疫组织化学染色中,内源性生物素易结合亲和素,形成亲和素一生物素复合物,导致假阳
,拿出室温冷却6分钟,再微波续热至沸腾后完全室温冷却 4.滴加5%BSA封闭液,37℃反应30分钟。甩去多余液体,不洗 5.滴加一抗,4℃反应过夜。所配一抗的浓度为1µg/ml 6.PBS缓冲液(PH7.2-7.6)洗10分钟×3次,滴加生物素化二抗IgG(抗兔或抗鼠)37℃反应30分钟 7.PBS缓冲液(PH7.2-7.6)洗10分钟×3次,滴加试剂SABC,37℃反应30分钟,PBS洗30分钟×3次 8. DAB室温显色,镜下控制反应
是不是做 Western 的时候,会遇到这样的情况呢?没错,就是背景很脏。造成背景脏的原因有很多,比如一抗没洗干净,或者二抗没洗干净,还有就是封闭的时候不完全。但其实,封闭液也是你们很容易忽略的一个环境哈。封闭液有几种?除了脱脂奶粉和 BSA 还有啥你们能想到的?第一种封闭液就是脱脂奶粉,这是异常便宜的封闭液品种,当然也应该是你们最常用的封闭液配方了。(甚至我们用过特仑苏)但是,你们应该注意到的是,脱脂奶粉中有大量的生物素,也就是说你做的蛋白要是用生物素标记的,一抗也是抗生物素的。那用脱脂
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