Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspase-6,8 substrate

Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspas

e-6,8 substrate
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      上海信裕

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      Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspase-6,8 substrate

    Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspase-6,8 substrate计数:培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspase-6,8 substrate所以要进行细胞计数,计数结果以每毫升细胞数表示,细胞计数的原理和方法怀与血细胞计数相同,血细胞计数器;手工计数细胞,COUI TER计数仪;人工计数。

    Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspas
    1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液,10mLPBS洗一遍
    2.0.25%胰酶(预热20分钟左右)2ml消化,轻轻摇晃,Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspase-6,8 substrate直至肉眼见单层细胞呈块状脱落(或在显微镜下观察细胞之间分离),立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化,轻柔吹打8-10次成单细胞。
    3.离心1000rpm*5min,弃上清,加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
    4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中,每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液,正常情况下2-3天就可以长满,期间不用换液。
    Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspase-6,8 substrate的传代方法:首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%,不需要长满,就准备传代。倒掉旧的培养基,再用已经高压灭菌过的PBS洗1-2次,我用的是25平方厘米的培养瓶,加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤,再用一次性过滤器过滤除菌,Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspase-6,8 substrate再分装成1ml的小包装,刚好每次用完一个,避免每次反复冻存,会使胰酶的活性下降),加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化,一旦发现细胞开始变园收缩,大约1-3分钟时间,必要时可以吹打帮助细胞分散,就立即加入培养基中和胰酶,如有EDTA最好要离心(800rpm,5min),弃上清夜,Ac-IETD-AFC Fluorogenic caspase-6,8 substrate再加入完全培养基吹匀,再分瓶,一般一瓶可以分2-3瓶。放入5%的CO2培养箱,37度培养24小时后观察。
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    xy-E11876 小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒 检测范围
    xy-E11877 小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 检测范围
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    xy-E11883 小鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒 检测范围
    xy-E11884 小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA试剂盒 检测范围
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