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上海钰博
主要成分:含4500mg/L D-葡萄糖,110mg/L丙酮酸钠,3700mg/L碳酸氢钠,15mg/L酚红,100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素。 pH值7.0-7.4。
保存条件:2℃~8℃,避光
使用说明:用于细胞培养,不用于诊断和治疗。
配制每升培养基,DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入: 胰化蛋白胨10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。
DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)1、LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素,并且倒好板。 LB固体培养基倒板 1。配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)2、抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)3、倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)4、保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。 配400ml的话成分按比例减少就行了,pH还是要按规定的。
yb-1294 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞)
yb-1295 AAV-293( 胚肾细胞 )
yb-1296 hFOB 1.19(SV40 转染成骨细胞)
yb-1297 CCD-1095Sk(皮肤细胞 )
yb-1298 Hs 578Bst(乳腺细胞)
yb-1299 NK-92(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
yb-1300 NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
yb-1301 HMy2.CIR(人B 淋巴母细胞)
yb-1302 OK(负鼠(opossum)肾细胞)
yb-1303 FO(骨髓瘤细胞)
yb-1304 RAW 264.7(单核巨噬细胞白血病)
yb-1305 P19(畸胎癌细胞)
yb-1306 C6(胶质瘤细胞)
yb-1307 RBL-2H3(白血病细胞)
yb-1308 SiHa(子宫颈癌细胞)
yb-1309 MG-63(骨肉瘤细胞)
yb-1310 HEC-1-B(子宫内膜腺癌细胞)
yb-1311 SW1353(骨肉瘤细胞)
yb-1312 ES-2(卵巢透明细胞癌细胞)
yb-1313 Saos-2(成骨肉瘤细胞)
yb-1314 MDA-MB-468(乳腺癌细胞)
yb-1315 SK-MES-1(肺鳞癌细胞)
yb-1316 MDA-MB-435S(乳腺癌细胞)
yb-1317 NCI-H661(大细胞肺癌细胞)
yb-1318 ZR-75-1(乳腺癌细胞)
yb-1319 NCI-H292(肺癌细胞(淋巴结转移))
yb-1320 Hs 578T(乳腺癌细胞)
yb-1321 U-937(组织细胞淋巴瘤细胞)
yb-1322 CFPAC-1(胰腺癌细胞)
按照培养基的成分来分 培养基按其所含成分,DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)按照培养基的物理状态分 培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)按照微生物的种类分 培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗).按照培养基用途分 培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基 。
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文献和实验家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
酶(collagenase) 200U/ml 0.4%台盼兰、0.25胰蛋白酶Method 1 组织块法1、取材:空气栓塞法处死家兔后,在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM培养基(含双抗)。迅速带回到无菌超净台上。(注意事项:椎间盘位于相邻两个椎体之间,取材过程较为繁琐,要求动作迅速,争取在家兔死后半小时内完成,否则,该组织对缺氧耐受性差导致培养失败)。2、剪切:在超净台上,进一步将周围组织分离,用Hank’s液冲洗数遍,直到冲洗液透明为止。眼科剪刀将组织修剪为1~2cm3大小的小组织块,Hank’s
区别是前者不含有Ca2+、Mg2+,因此D-Hank"s常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有较高的NaHCO3(2.2g/L),适合于5%CO2的培养条件,Hank"s平衡液仅含有0.35g/L NaHCO3,不能用于5%CO2的环境,若放入CO2培养相,溶液将迅速变酸,使用时应注意。 配制溶液应使用双蒸水或去离子水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+,应当首先溶解这些成分。配好的平衡盐溶液可以过滤除菌 或高温灭菌。 二、消化液:取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞
方法主要有两种,高压除菌及0.22um微孔滤膜过滤除菌。与过滤相比,高压灭菌的工作强度小,成本较低,但易造成营养成分的流失,而且在多次加样(无菌谷氨酰胺溶液,无菌碳酸氢钠溶液等)过程中容易造成二次污染。大多数培养基采用0.1~0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌,并且已成为培养基除菌的发展方向,它可低限度地减少培养基的营养损失。 4.1 高压灭菌 某些培养基(如MEM)可进行高压灭菌,例如清大天一的MEM培养基中的MD605、MD609等。这类培养基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠,一般是在培养
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