DMEM高糖（不含酚红，含双抗）

家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法

酶(collagenase) 200U/ml 0.4%台盼兰、0.25胰蛋白酶Method 1 组织块法1、取材：空气栓塞法处死家兔后，在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM培养基（含双抗）。迅速带回到无菌超净台上。（注意事项：椎间盘位于相邻两个椎体之间，取材过程较为繁琐，要求动作迅速，争取在家兔死后半小时内完成，否则，该组织对缺氧耐受性差导致培养失败）。2、剪切：在超净台上，进一步将周围组织分离，用Hank’s液冲洗数遍，直到冲洗液透明为止。眼科剪刀将组织修剪为1~2cm3大小的小组织块，Hank’s

HBSS的配制和使用攻略

4 ， 47.5 mg/L Na2 HPO4 ， 调pH至7.2. HBSS一共分为四种，含钙镁，含酚红;含钙镁，不含酚红;不含钙镁，含酚红(D-Hanks );不含钙镁，不含酚红(D-Hanks)。此四种产品可根据客户需要自己选择。而如果客户无法判断应该选择哪一种，可以选不含钙镁，不含酚红(D-Hanks )。 　 Hanks’ 含钙镁 含酚红 Hanks’

大鼠心室肌微血管内皮细胞的原代培养

、饱和湿度的细胞孵育箱静置培养，使其贴壁，4小时后追加20%胎牛血清的DMEM高糖培养液4.5ml/瓶，约48小时后组织块周围有星形细胞长出.80至96小时组织块周围有大量细胞长出，去除组织块，继续培养36-48小时，待细胞汇合铺满瓶底后用含0.125%胰蛋白酶、0.02%EDTA的消化液消化细胞进行传代，取用第二代细胞进行进一步鉴定和实验。