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人生长相关蛋白43(GAP43)酶联免疫吸附测定试剂盒

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  • 2025年07月11日
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      1000

    • 供应商

      沪震生物

    • 检测范围

      见说明书

    • 检测方法

      酶联免疫

    • 应用

      科研

    • 样本

      血清/血浆/组织/尿液

    • 规格

      48t/96t

    英文名称 Human GAP43 (Growth Associated Protein 43) ELISA Kit
    中文名称 人生长相关蛋白43(GAP43)酶联免疫吸附测定试剂盒
    货号 hz-H1922c 种属 Human/人
    规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
    检测方法 双抗体夹心法
    检测范围 0.156~10ng/mL 灵敏度 0.094ng/mL
    人生长相关蛋白43(GAP43)酶联免疫吸附测定试剂盒本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人GAP43抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人GAP43与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人GAP43抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人GAP43抗体与结合在包被抗体上的人GAP43结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人GAP43浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中人GAP43的浓度。
    人生长相关蛋白43(GAP43)酶联免疫吸附测定试剂盒

    1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL, 37℃孵育90分钟

    2. 加入100μL 生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟

    3. 洗涤3次

    4. 加入100μL酶结合物工作液, 37℃孵育30分钟

    5. 洗涤5次

    6. 加入90μL底物溶液, 37℃孵育15分钟左右

    7. 加入50μL终止液,立即在450nm波长处测量OD值

    8. 结果计算

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    • 别小瞧了ELISA

      微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。 四、温育 温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素

    • Elisa实验的标准操作方法

      化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。 (2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原 抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。 (3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻

    • 如何正确的进行ELISA测定操作

      标本的收集则没有时间和体位方面的影响,只是在处理和保存方面要考虑以下几个方面:(1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。(2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生

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