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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
20%乙醇4-8℃保存
- 保质期:
3年
- 英文名:
ProteinA Berpharose FF
- 库存:
大量
- 供应商:
北京博尔西科技有限公司
- 规格:
1ml预装柱
提示:本店全部产品均为科研、实验专用试剂,非药品、非食品、非体外诊断试剂,不可用于动物及人体!
重组蛋白A-琼脂糖凝胶FF
(Protein A Berpharose FF)
1.产品介绍
重组蛋白A琼脂糖凝胶FF(Protein A Berpharose FF)亲和介质以自制的琼脂糖凝胶为基质,以重组蛋白A(rProtein A)为配基,具有很高的物理化学稳定性,配基不易脱落,寿命长,使用方便,应用广泛。蛋白A(Protein A)能特异性地与抗体IgG分子的Fc区结合,所以Protein A亲和介质可用于抗体(单抗和多抗)的分离纯化,经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。
2.规格
1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、25ml、100ml、500ml、1L
3.产品性能
| 性能 | 指标 |
| 基质 | 4%琼脂糖微球 |
| 配基 | 重组蛋白A |
| 配基密度 | >6mg/ml |
| 载量 | ≥35mg人IgG /ml |
| 粒径 | 45-165μm |
| *大耐压 | 0.3Mpa |
| 流速 | 50-300 cm/h |
| pH稳定范围-工作/清洗 | 3~9/3~10 |
| 储存缓冲液 | 20%乙醇 |
| 储存温度 | 4-8℃ |
4. IgG与蛋白AG结合强度比较
| 种类 | 亚类 | 蛋白A | 蛋白G | 蛋白A蛋白G融合蛋白 |
| 人 | IgG1 | +++ | +++ | +++ |
| IgG2 | +++ | +++ | +++ | |
| IgG3 | + | +++ | +++ | |
| IgG4 | +++ | +++ | +++ | |
| IgM | + | - | + | |
| IgD | - | - | - | |
| IgA | + | - | + | |
| Fab | + | + | + | |
| 兔 | IgG | +++ | ++ | +++ |
| 山羊 | IgG1 | + | +++ | +++ |
| IgG2 | +++ | +++ | +++ | |
| 牛 | IgG1 | + | +++ | +++ |
| IgG2 | +++ | +++ | +++ | |
| 小鼠 | IgG1 | + | +++ | ++ |
| IgG2a | +++ | +++ | +++ | |
| IgG2b | +++ | +++ | +++ | |
| IgG3 | ++ | +++ | +++ | |
| IgM | - | - | - | |
| 大鼠 | IgG1 | + | ++ | ++ |
| IgG2a | - | +++ | +++ | |
| IgG2b | - | + | + | |
| IgG2c | +++ | +++ | +++ | |
| 猪 | IgG | +++ | ++ | +++ |
| 犬 | IgG | +++ | + | +++ |
| 鸡 | IgY | - | - | - |
| 马 | IgG(ab) | + | ++ | + |
| IgG(c) | + | ++ | + |
5.纯化流程
应用举例:
结合缓冲液:20 mM磷酸缓冲液,150 mM NaCl,pH 7.0
洗脱缓冲液:0.1M甘氨酸,PH3.0或0.1M柠檬酸缓冲液,pH 4.0
中和缓冲液:1 M Tris-HCl,pH 8.5
1) 1 ml重组蛋白A琼脂糖凝胶预填柱用5-10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液。
2)用结合缓冲液结合缓冲液平衡5-10个柱床体积。
3)将5 ml人多抗血清用结合缓冲液稀释到50ml,0.45μm滤膜过滤上样。
4)用结合缓冲液再洗5-10个柱床体积。
5)用洗脱缓冲液洗脱抗体,收集洗脱峰,并用中和缓冲液调节其pH至中性。
6)每次使用后依次使用3个柱体积的结合缓冲液,5个柱体积的去离子水, 5 个柱体积的 20%的乙醇平衡保存,防止填料被细菌污染。
7) SDS-PAGE电泳分析。
6.注意事项:
1)样品洗脱后一般pH很低,应立刻用碱性中和缓冲液(如1MTris-HCl,pH8.5)将收集到的抗体溶液中和到中性,或在收集容器中事先装5-10%、pH7.5的缓冲液(如1MTris-HCl或1M磷酸缓冲液),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
2)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
3)填料再生清洗:随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量下降,严重影响纯化效果,这时需要对填料进行再生清洗(如下步骤)
去除沉淀或变性物质:用 2 倍柱体积的 6M 盐酸胍溶液进行清洗,然后立即用 5 倍柱体积的 PBS, pH 7.4 清洗。
去除疏水性吸附造成的非特异性吸附物质:用 3-4 倍柱体积的 70%乙醇或 2 倍柱体积的 1% Triton™ X-100 清洗,然后然后立即用 5倍柱体积的 PBS, pH 7.4 清洗
4)本产品保存条件:20%乙醇,4~8℃。
层析柱(预装柱)填料目录:
亲和层析填料(预装柱)
★蛋白A琼脂糖凝胶 FF (Portein A Berpharose FF)
★蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein G Berpharose FF)
★耐碱蛋白A琼脂糖凝胶 FF (rat-Portein A Berpharose FF)
★蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein AG Berpharose FF)
★镍-琼脂糖凝胶FF (Ni- Berpharose FF)
★链霉亲和素琼脂糖凝胶 FF (Streptavidin Berpharose FF)
★Strep-Tactin琼脂糖凝胶 FF (Strep-Tactin Berpharose FF) (StrepII标签蛋白纯化)
★肝素-琼脂糖凝胶 FF (Heparin- Berpharose FF)
★大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 FF (STI- Berpharose FF)
内毒素清除琼脂糖凝胶 (Endotoxin Removal Reagent Berpharose)
GST-琼脂糖凝胶FF (GST Berpharose FF)
钴-琼脂糖凝胶FF (Co- Berpharose FF)
真菌毒素检测免疫亲和柱
黄曲毒素(总量:B族G族、M1、B1)- 免疫亲和柱 (AFT-IAC)
赭曲霉毒素A-免疫亲和柱 (OTA-IAC)
玉米赤霉烯酮-免疫亲和柱 (ZEA-IAC )
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)-免疫亲和柱 (DON-IAC)
T-2毒素-免疫亲和柱 (T-2 toxin-IAC)
伏马毒素-免疫亲和柱 (FB1、FB2、FB3-IAC)
活化填料
NHS活化琼脂糖凝胶 FF (NHS Activated Berpharose FF)
环氧活化琼脂糖凝胶 FF ( Epoxy Activated Berpharose FF)
离子交换层析填料(预装柱)
DEAE-琼脂糖凝胶 FF(DEAE Berpharose FF)
Q-琼脂糖凝胶FF(Q Berpharose FF)
CM-琼脂糖凝胶FF(CM Berpharose FF)
SP-琼脂糖凝胶FF(SP Berpharose FF)
DEAE、Q、CM、SP(预装柱套装4支)
疏水层析填料(预装柱)
苯基-琼脂糖凝胶 FF(Phenyl Berpharose FF)
辛基-琼脂糖凝胶 FF(Octyl Berpharose FF)
丁基-琼脂糖凝胶 FF(Butyl Berpharose FF)
苯基、辛基、丁基(预装柱套装3支)
凝胶过滤层析填料(预装柱)
| 型号 | 分离范围 |
| 琼葡糖凝胶G10 | <700 |
| 琼葡糖凝胶 G15(脱盐柱) | 100-1500 |
| 琼葡糖凝胶 G25 (脱盐柱) | 1000-5000 |
| 琼葡糖凝胶 G50 | 1000-30000 |
| 琼葡糖凝胶 G75 | 3000-80000 |
| 琼葡糖凝胶 G100 | 4000-120000 |
| 琼葡糖凝胶 G150 | 5000-300000 |
| 琼葡糖凝胶 G200 | 5000-600000 |




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文献和实验去内毒素琼脂糖凝胶 FF 1ml预装柱 3000-5000Eu/ml 去除各种样品中的内毒素,方便快捷,回收率高。 ¥360 CS-L01-01 25ml ¥2500 CS-L01-02 100ml ¥6000 CS-L01-03 500ml ¥25000 CS-L01-04 大包装 ¥询价 亲和色谱填料 货号 产品名称 规格 特性及应用 价格 CS-A01-00 镍琼脂糖凝胶 FF
单抗多为IgG,来源主要是腹水和混合瘤培养上清夜。腹水有大量白蛋白、转铁蛋白和宿主抗体等。Protein G和ProteinA对IgG的Fc区有专一性亲和作用,能一步醇化各种不同源的IgG。血清互补剂如小牛血清可先用蛋白G预处理,在培养前除去IgG。重组蛋白A介质rProtein A Sepharose FF对IgG有更高的栽量和专一性,基团脱落更少。脱落的rProtein A用离子交换Q Sepharose Hp或凝胶过滤Superdex 200,很容易去除。 疏水层析pheny
,来源主要是腹水和混合瘤培养上清夜。腹水有大量白蛋白、转铁蛋白和宿主抗体等。Protein G和ProteinA对IgG的Fc区有专一性亲和作用,能一步醇化各种不同源的IgG。血清互补剂如小牛血清可先用蛋白G预处理,在培养前除去IgG。重组蛋白A介质rProtein A Sepharose FF对IgG有更高的栽量和专一性,基团脱落更少。脱落的rProtein A用离子交换Q Sepharose Hp或凝胶过滤Superdex 200,很容易去除。 疏水层析pheny1 Sepharose HP










