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- 技术资料
- 保存条件:
-20℃避光干燥保存
- 保质期:
有效期一年
- 英文名:
LysoSensor™YellowBlue DND-160 (PDMPO)
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
50μl
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
促销价(元) |
| LysoSensor™ Yellow/Blue DND-160 (PDMPO) 溶酶体黄/蓝色荧光探针 |
40768ES50 |
50 μL |
425.00 |
404.00 |
产品描述
LysoSensor®系列探针是对活细胞中的酸性区室(如溶酶体、顶体精子)pH值进行检测的一类荧光探针,该类探针的染色具有向酸性,可通过质子化作用在酸性细胞器内累积。该类探针的这种向酸性可解除染料的荧光淬灭性,使其所发射的荧光强度更强。因此,与LysoTracker系列探针相比,LysoSensor®系列探针随着细胞器的酸化程度其荧光强度呈pH依赖型(向酸)增强。
本品LysoSensor™ Yellow/Blue DND-160 (PDMPO)是一种用于测定溶酶体pH值的比率测量型探针,也是LysoTracker®系列探针中唯一的一种pH依赖型显示双激发和双发射波长的荧光探针,该探针在中性环境中产生蓝色荧光(Ex/Em=329 nm/440 nm),但当所处环境变为偏酸性时,则发射黄色荧光(Ex/Em=384 nm/540 nm)。本品以溶于无水DMSO的1 mM储存液形式提供。
产品性质

| 分子式(Molecular Formula) |
C20H22N4O3 |
| 分子量(Molecular Weight) |
366.4188 |
| Ex/Em |
Ex=329 nm, 384 nm Em=440 nm, 540nm |
| pKa |
~4.2 |
| 结构式(Structure) |
|
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃避光干燥保存,避免反复冻融,有效期一年。
注意事项
1. 不能储存在无霜冰箱,建议按照单次用量分装于-20℃冻存。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途!
使用方法
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1. 工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1 mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度至少为1 µM;
【注1】:1)为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
2)若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
【注2】:工作液现配现用。
2. 染色
2.1 对于贴壁细胞
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30 min~2 h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
【注】:对LysoSensor™ YellowBlue DND-160 (PDMPO)内化过程的动力学研究表明,活细胞摄取此染料仅需数秒即可。缺点在于此探针可能引起溶酶体产生“碱性效应Alkalizing effect”,也就是说过长孵育时间会诱导溶酶体pH值提高。建议仅当该探针于37℃孵育细胞1-5 min才可用作pH指示剂。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30 min~2 h(具体时间需根据细胞类型而定)。
【注】:对LysoSensor™ YellowBlue DND-160 (PDMPO)内化过程的动力学研究表明,活细胞摄取此染料仅需数秒即可。缺点在于此探针可能引起溶酶体产生“碱性效应Alkalizing effect”,也就是说过长孵育时间会诱导溶酶体pH值提高。建议仅当该探针于37℃孵育细胞1-5 min才可用作pH指示剂。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注】:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
HB220308
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细胞 , 稳定不漏出: Mitoracker Orange CMTMRos 551/576, (氧化型)Mitoracker Orange 还原型, 只能染活细胞 (2)溶酶体 Lysosome中性红 541/640: 微偏碱性, 可标记溶酶体等酸性器官为非特异性 AO : LysoTracker Green DND-26 504/511, 染活细胞 LysoTracker Blue LysoTracker Red (3)内质网 Endoplasmic
最佳探针: Mitotracker Green FM 490/516, 染活细胞或固定细胞 , 稳定不漏出: Mitoracker Orange CMTMRos 551/576, (氧化型)Mitoracker Orange 还原型, 只能染活细胞 (2)溶酶体 Lysosome中性红 541/640: 微偏碱性, 可标记溶酶体等酸性器官为非特异性 AO : LysoTracker Green DND-26 504/511, 染活细胞 LysoTracker Blue
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