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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃保存一年;-20℃长期保存
- 库存:
10
- 供应商:
乔羽生物
- 规格:
瓶
编号:QY-mv0145
细胞名称:A7r5 大鼠胸大动脉平滑肌细胞
规格:瓶
用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗.
A7r5 大鼠胸大动脉平滑肌细胞报价细胞相关操作:
细胞复苏
1.37°C水浴预热培养基(DMEM+10% FBS);
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C,5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧);
6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。
细胞传代
1.当细胞融合度达到90%以上时,给细胞传代;
2.37°C水浴预热培养基(DMEM+10% FBS);
3.在超净台中,弃培养基,加入2-5mlPBS清洗细胞后,再加入1ml胰酶消化细胞;
4.显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,加入5ml培养基(DMEM+10% FBS)终止消化;
5.用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;
6.将细胞移入离心管中,1000rpm离心5min;
7.弃上清,加入15-20ml的培养基(含血清)重悬细胞后转入T75培养瓶中或按适当比例传到T25瓶中(确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间),细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混匀细胞悬液,确保细胞均匀分布;
8.将培养瓶置于37°C,5% CO2的无菌培养箱中培养。
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文献和实验氯醛0。3ml/100g腹腔麻醉 2. 绑好大鼠,先剪开腹腔,剪断腹部大动脉放血,后剪开胸腔,取肺 3. 放入烧杯,后移入超净台,置于冰盒上。以后的操作皆在冰盒上操作 4. 倒入已加双抗的D-HANKS,清洗肺部,扯掉食管,剪掉心脏 5. 用针头将肺固定在硅胶板上,硅胶板置于培养皿里 6. 用镊子将肺的内外膜除去,只剩下平滑肌 7. 用眼科剪将肺部剪成1-2mm的小碎块 8。在培养瓶中加入一到两滴的FBS,轻摇培养瓶,使血清铺满瓶底。 9。用眼科剪将碎块放进瓶中,后用滴管
我养了快半年的大鼠气道平滑肌细胞,有一点体会,特发上来和各位战友交流一下,互相进步。 壹. 器械 显微器械:眼科剪一把,直弯眼科镊各一把,细结镊一把,手术刀一把,针头诺干 杀老鼠器械:手术剪一把,大镊子一把,弯眼科镊一把,组织钳一把,50ml烧杯一个(锡纸包好) 另外:10ml离心管两个,培养皿两个,10ml的瓶子三个,小滤器两个,硅胶板一块,培养瓶盖子诺干 贰。试剂 D-HANKS液250ml,双抗2ml(青霉素16万U/ml链霉素15万U/ml),一型胶原
PriCells –正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:肌动蛋白
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