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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃保存
- 保质期:
有效期6个月
- 英文名:
Lentivirus HIF-1 Luciferase Reporter
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
50μl×4管;2×10e7TU/ml
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
| Lentivirus HIF-1 Luciferase Reporter HIF-1-Luc报告基因慢病毒颗粒 |
11620ES70 | 50μl×4管;2×10e7TU/ml | -80℃ | 4938.00 |
HIF-1报告基因慢病毒是翊圣生物自主研发的用于检测HIF-1转录活性水平为目的的报告基因慢病毒颗粒。HIF-1(hypoxia-inducible factor-1)是氧平衡有关的关键蛋白,并且在癌症的发展以及在心血管疾病中有着显著作用。
HIF-1报告基因慢病毒主要用于检测细胞中细胞中Hypoxia信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMLV-HIF-1-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒载体的多克隆位点插入了多个HIF-1结合位点,可以高灵敏度地检测HIF-1的激活水平。采用慢病毒作为报告基因的优点在于它能够感染多种难感染的细胞,比如原代细胞,干细胞,神经元细胞等。而且慢病毒能够将外源基因插入细胞基因组内,实现稳定转染。
质粒图谱
使用说明
HIF-1报告基因慢病毒颗粒采用慢病毒转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
运输和保存方法
干冰运输。-80℃保存,有效期6个月,如保存时间过长,使用前请重新检测病毒滴度。
注意事项
1)病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。
2)病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。
3)操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯|酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯|酸钠溶液浸泡1h以上后弃去。
4)用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。
5)病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
参考文献
[1] Martinez-Outschoorn UE, Trimmer C, Lin Z, et al. Autophagy in cancer associated fibroblasts promotes tumor cell survival: Role of hypoxia, HIF1 induction and NFκB activation in the tumor stromal microenvironment.Cell Cycle. 9(17):3515-33(2010).
[2] Smirnova NA, Rakhman I, Moroz N, et al. Utilization of an in vivo reporter for high throughput identification of branched small molecule regulators of hypoxic adaptation.Chem Biol. 17(4):380-91(2010).
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文献和实验在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品
zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题,未得其解,恳请帮助。 做荧光素酶报告基因的时候,检测的是细胞因子的启动子。换句话说,是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内,通过刺进因素作用后,检测启动子的表达情况。这个是背景。 问题是,怎么通过使用内参的方法,去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。 因为,个人认为,细胞数对报告基因的表达量影响比较大。 谢谢。 daidaiyidaidai
【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题,两者的区别我基本清楚了,只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒(分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因)呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话,是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因,还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件?谢谢 msniu
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