Sigma货号P5726-5ml现货Phosphatase Inhibitor蛋白酶抑制剂13611631389上海睿安生物
说明
一般描述
Phosphatase Inhibitor Cocktail 2 is a mixture of components designed to inhibit enzymes that modify proteins present in cell extracts, leading to improved yields of intact proteins. It has been optimized and tested for use on various animal tissues and cytosolic extracts.
应用
磷酸酶抑制剂混合物可通过向能够对细胞提取物中存在的蛋白进行修饰的酶添加抑制剂来提高完整蛋白的产量。 该产品已针对酪氨酸蛋白磷酸酶、酸性和碱性磷酸酶进行了优化和测试。 它已对来自包括牛肝和人胎盘的动物组织的细胞提取物和兔肌肉细胞提取物进行了测试。
生化/生理作用
该混合物含有具有特异性抑制属性的独立成分。 原钒酸钠可抑制多种ATP酶、蛋白酪氨酸磷酸酶和其他磷酸转移酶。 钼酸钠可抑制酸性和磷蛋白磷酸酶。 酒石酸钠可抑制酸性磷酸酶。 咪唑可抑制碱性磷酸酶。
特点和优势
该化合物是激酶磷酸酶生物学研究的特色产品。
点击此处以发现更多的激酶磷酸酶生物学研究特色产品。可访问sigma.com/discover-bsm了解更多关于用于其他研究领域生物活性小分子。
注意:该产品在供货后可在推荐的2-8°C储存温度下稳定两年。
制备说明:该混合物以透明溶液形式提供。 它已通过无菌填充的瓶子中的0.2 μm膜进行了无菌过滤。 一毫升将可抑制来自人胎盘、牛肝、兔肌肉、A431或Jurkat细胞提取物的100,000 x g上清液中发现的蛋白浓度约为5 mg/mL的磷酸酶活性。
特别声明:
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PBMC/人外周血单个核细胞/PBMC细胞/人外周血单个核细胞/冻存PBMC/hPBMC单个核细胞13611631389上海雅裕生物&上海睿安生物
新鲜和冷冻保存的人外周血单个核细胞(Human Peripheral Blood Mononuclear Cells)是外周血中具有单个核的细胞的混合群体,是免疫细胞的丰富来源,可以进一步纯化分离单个细胞类型,如天然杀伤细胞(Natural Kller Cell,NK),T淋巴细胞,B淋巴细胞等。此外,其中的单核细胞(monocyte)与各种细胞因子一起培养,可定向分化为巨噬细胞或树突状细胞等。
产品优势:
1、稳定高质量的健康人群细胞来源,全部细胞经HBV、HCV、HIV和TP血清学和核酸检测阴性;
2、给予全方位的技术支持(从冷冻细胞复苏到常规实验的-些建议;
3、可提供伦理证明和COA(细胞数量、存活率、B细胞和T细胞比值信息);
4、可提供新鲜细胞,货期一周;冷冻PBMC细胞:库存充足;
5、保证新鲜细胞活性>90%,,冷冻产品复苏后活性>90%。
定制化服务:
1.可根据客户实际实验需要提供小规格产品(1 million)进行测试,测试期间可预留相同Donor其它规格产品;
2.可根据客户实验需求提供某一亚型细胞含量高的产品(如CD56+, CD4+, CD8+, CD3+, CD14+等);
3.可根据客户实际实验需求筛选制定指标的Donor。
PBMC人外周血单核细胞培养前的准备:
在您带上手套开始细胞培养之前,先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足,以免在开始实验后再次出入操作台,这样可以降低细胞污染的风险。细胞培养基也应先预热,选择只预热部分培养基而非整瓶加热,不但可以节约实验时间,而且可以避免因反复加热培养基而造成的蛋白质降解。结束操作后别忘了培养基对光敏感,应尽可能避光保存。
细胞培养的定期检查:
定期检查培养细胞的形态,即形状和外观,对于细胞培养实验取得成功至关重要。除确认细胞的健康状态外,每次操作细胞时通过肉眼和显微镜检查细胞还可早期发现污染征象,避免污染扩散至实验室其他细胞。
培养瓶/皿等物品的无菌操作:
无菌培养瓶、试剂瓶、培养皿等物品使用时方可揭开盖子,不得将其开放暴露于环境中,操作完成后尽快盖上盖子,取下盖子时应将盖子开口朝下放在工作台面上。
PBMC人外周血单核细胞培养中可能的污染物:
细胞培养污染物主要分为两类:化学污染物,如培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和去污剂。生物污染物,如细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体以及其他细胞系的交叉污染。可通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术,降低污染发生的频率和严重程度。
细胞换液注意事项:
为细胞换液时,要沿着培养瓶的一侧轻轻地加入,而不是直接加到细胞中,以免损伤细胞,当培养的细胞株较为脆弱时尤其需要注意。使用无菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液体时,每支吸管只能使用一次,以免交叉污染。
细胞传代的时间把握:
当细胞呈指数增殖,贴壁培养的细胞已占据所有可用基质、没有扩增空间,或悬浮培养的细胞已超过培养基质所支撑的能力,无法进一步生长时,细胞增殖速度将大大降低甚至完全停止。为了将细胞密度维持在最佳水平,以便细胞继续生长,并且刺激进一步增殖,必须对细胞进行传代。
细胞培养中使用抗生素的注意事项:
细胞培养时不应长期使用抗生素,因为连续使用抗生素会促进抗生素耐药性细胞株的产生,导致轻度污染持续存在。抗生素只能作为对付污染的最后手段短期使用,并尽快撤除。如果长期使用抗生素,则应同时进行无抗生素培养,以便作为鉴别隐性感染的对照。
PBMC人外周血单核细胞培养方法:
一、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:取出25cm²培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5% CO₂细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
二、细胞传代:
(1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm²培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
(2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1m至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm高心5min;
(3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5% CO₂细胞培养箱中培养;
(4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
三、细胞冻存:
(1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm²培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
(2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm高心5min;
(3)用适量的冻存液(FBS:DMS0=9:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
(4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
四、细胞复苏:
(1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
(2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
(3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm²培养瓶,于37℃、5% CO₂细胞培养箱中培养;
(4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
一、╳※试剂※╳PBMC分离服务:PBMC/人外周血单个核细胞/PBMC细胞/人外周血单个核细胞/冻存PBMC/hPBMC单个核细胞
二、╳※试剂※╳:
常规血清优势供应:Access货号51HI血清、Gemini货号900-108血清、Gemini血清、Gibco血清(10099-141澳洲血清、10270-106南美血清、16000-044血清)、BI血清BI货号04-001-1ACS、Sigma货号F8318-500ml澳洲胎牛血清、Sigma货号F8687澳洲胎牛血清、Sigma货号F0193南美胎牛血清[(乌拉圭)胎牛血清]、Sigma货号F2442-500ml特级胎牛血清、ScienCell货号0500澳洲胎牛血清、Cegrogen货号A0500-3010胎牛血清、Cegrogen货号B0500-5010新生牛血清、康源血清
培养基(包括无血清)、冻存液(包括无血清),包括:友康Yocon
Merck(Millipore/Sigma/Roche/KaPa/Supelco/Avanti/Corning/Brand)正式授权代理、博奥龙Biodragon独dú家总代理、EFL独dú家总代理、碧云天Beyotime代理、Proteintech、Active Motif正式授权代理
☆☆☆☆☆☆Beckman货号A63881纯化磁珠Agencourt AMPure XP(60ml/瓶)/A63882(450ml/瓶);Beckman货号B23317核酸片段筛选试剂盒Agencourt SPRIselect(5ml/瓶)
分子类:Biotium货号41003的GelRed染料、货号31000的EvaGreen染料、Zymo Research、Qiagen
饲料类:Research Diets、Dyets
三、╳※耗材※╳:
洁特JET耗材(各类常规用实验耗材)、赛普Cellpro耗材/KirGen耗材、博麦迪(常规的)各类试剂瓶
Bioplastics
Thermo Fisher Scientific的很多产品线,包括旗下的:
一、Nunc耗材
二、QSP耗材(各类吸头/滤芯吸头、离心管、PCR管等)
三、Nalgene耗材仪器
四、FisherBrand耗材仪器(含各类盖玻片载玻片等)
五、LabServ耗材仪器
六、Finnpipette移液器(如:F1系列、F2系列、F3系列等等各类型号的移液器)
七、Abgene耗材
畅销款:我们是常备有大量现货的
可请随时咨询:万奎13611631389(可以请加微信),邮箱:13611631389@163.com、wankui@rainbio.com.cn
※╳√√✓✔√✓✔√✓✔上海睿安生物科技有限公司成立于2009年,专注于为生命科学和生物技术领域的客户提供优质的产品与服务。代理了多家欧美知名品牌,如美国Thermo Fisher耗材(包括旗下Nunc、QSP、Nalgene、FisherBrand、LabServ耗材仪器、Finnpipette移液器、Abgene耗材,等等)、默克Merck-Millipore/Sigma/Roche/KaPa/Supelco/Avanti/Corning/Brand)、Zymo Research、洁特JET耗材(各类常规用实验耗材)、赛普Cellpro耗材、博奥龙Biodragon独dú家总代理、EFL独dú家总代理、碧云天Beyotime代理、Eppendorf、友康Yocon、Research Diets高脂饲料,IBL、BioVendor、Mercodia、ShiBayaji代谢类产品、Axygen-Corning长期大量耗材备货、BioCoat畅销款长期备货,Access货号51HI血清、Gemini血清、Gibco血清,BI血清现货、ScienCell血清、Sigma血清、Moregate血清、Cegrogen血清、Pierce发光试剂、Fermentas、Invitrogen、Proteintech、Active Motif、Abcam、CST、BD、SAB、R&D systems、Beckman、Qiagen、BD Pharmingen、Biolegend、Jackson、Miltenyi、MP Biomedicals、Biotium更好的荧光试剂产品等品牌。睿安生物始终将“提供更好的产品和服务”作为企业发展的目标和努力的方向,并将通过优质的售前与售后服务,始终如一地为客户提供高质量的产品和服务,我们也希望能得到相关领域中更多老师和同仁们的指导和鞭策,为共创优秀品牌而努力奋斗!询订╳直线13611631389微信号