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文献和实验细胞色素氧化酶二氨基联苯胺显示法( DAB 法) 氧化酶(oxdase)和脱氢酶(dehydrogenase)均使底物脱氢“氧化”,所不同的是氧化酶将氢与氧结合,而脱氢酶则把氢传给其他物质即受氢体,如辅酶I(NAD),辅酶Ⅱ(NADP)或黄素蛋白。 细胞色素氧化酶(cytochrome oxidase,CCO)在细胞有氧呼吸中起重要作用,为线粒体膜固有酶,是线粒体标志酶之一,常作为细胞内氧化代谢指标。在含有大量线粒体的细胞内均有高强度细胞色素氧
底物范围较广,包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3% (W
39 4.06 3.47 3.13 2.91 2.75 2.63 2.54 2.46 2.40 2.30 2.19 2.08 1.95 1.81 1.65 39 40 4.05 3.46 3.13 2.90 2.74 2.62 2.53 2.45 2.39 2.29 2.18 2.07 1.94 1.80 1.64 40 42 4.03 3.45 3.11 2.89 2.73 2.61 2.51 2.43 2.37 2.27 2.16 2.05 1.92 1.78 1.61 42
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