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文献和实验1.90134±2.30(106-146)4.66±0.405.30±0.50(4.00-5.90)96.7±1.1993.8±1.20(85.7-112)37.3±2.2039.1±2.30(32.7-44.1)5.29±0.966.04±1.10(3.40-8.24)9.52±0.9810.4±0.92(7.40-12.0)2.54±0.222.20±0.14(1.90-3.50)狗0.25±0.110.21±0.10(0.00-0.50)211±32.0150±17.0(137-275)1.35±
3) 将膜放入一塑料袋中,加入二抗溶液,加入量一般为0,1ml二抗溶液/cm2 膜,封好塑料袋,在室温下轻轻震荡1小时。 6. 剪开塑料袋,取出NC膜,在TBST溶液中冲洗1-5次,每次10分钟。 7. 显色 1) AP系统 a. 将膜放入碱性磷酸酶显色液(10ml碱性磷酸酶缓冲液,66ulNBT,33ulBCIP)中,室温下轻轻摇动。 b. 待条带出现后(约显色20分钟),将膜放入200ul0.5MEDTA
就是抗鼠IgG的抗体。处理后,带有标记的二抗与一抗结合形成抗体复合物可以指示一抗的位置,即是待研究的蛋白质的位置。目前有结合各种标记物的抗体特定IgG的抗体(二抗)可以直接购买,最常用的一种是酶连的二抗,印迹用酶连二抗处理后,再用适当的底物溶液处理,当酶催化底物生成有颜色的产物时,就会产生可见的区带,指示所要研究的蛋白质位置。在酶连抗体中使用的酶通常是碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化物酶(HRP)。碱性磷酸酶可以将无色的底物5-溴-4-氯吲哚磷酸盐(BCIP)转化为蓝色的产物;而辣根过氧化物酶
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