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500
- 供应商:
镜像绮点
- 肿瘤类型:
否
- 细胞类型:
-
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
皮肤组织
- 相关疾病:
否
- 物种来源:
组织
- 免疫类型:
否
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
-
- 器官来源:
皮肤组织
- 运输方式:
复苏
- 年限:
长期
- 生长状态:
良好
- 规格:
T25
细胞名称:DYR0100
细胞描述:将人包皮细胞诱导成 iPS 细胞,通过重编程转录因子为:OCT4、SOX2、KLF4、MYC 诱导建立 iPS 细胞,培养时无需饲养层细胞。
形 态:球形克隆
来源性别:男性疾 病:健康
年 龄:新生儿
细胞来源:从 ATCC 引进
ATCC number: ACS-1011TM
冻存日期/代数:详见 冻存管/培养瓶 标识建议复苏培养体系:1 个 T25 培养瓶
细胞状态:良好
支原体检测结果:阴性
细胞用途:仅供科研使用。
STR鉴定结果
|
D5S818 |
11 |
11 |
|
D13S317 |
11 |
13 |
|
D7S820 |
9 |
10 |
|
D16S539 |
12 |
12 |
|
VWA |
14 |
19 |
|
TH01 |
9.3 |
9.3 |
|
AMEL |
X |
Y |
|
TPOX |
8 |
11 |
|
CSF1PO |
7 |
11 |
|
D12S391 |
18 |
19.3 |
|
FGA |
21 |
22 |
|
D2S1338 |
17 |
19 |
iPS细胞完全培养基培养人诱导型多能干细胞
1.试剂和材料
iPS细胞完全培养基试剂盒
|
成分 |
规格 |
数量 |
储存条件 |
|
iPS细胞基础培养基 |
500mL |
1瓶 |
2-8℃ |
|
iPS细胞培养基添加剂 |
20mL |
1支 |
-20℃ |
所需的其它试剂和材料
|
产品 |
规格 |
货号 |
品牌 |
|
Y27632 |
1mg |
iPSMed-iCell-CA005 |
iCell |
|
Matrix |
5mL |
iPSMed-iCell-CA004 |
iCell |
|
iPS细胞消化液 |
500mL |
iPSMed-iCell-CA003 |
iCell |
|
另需细胞培养皿/瓶/板,15mL离心管和移液管等细胞培养耗材 | |||
2.培养流程
2.1.复苏
在开始复苏前,将所有试管、预热后的培养基和培养皿准备好,已确保尽快完成复苏过程。
将冻存管从液氮中取出,快速在37℃水浴槽中解冻,轻柔持续地摇动冻存管,直到只剩下一个小冷冻团。从水浴槽取出冻存管,70%乙醇擦拭进行消毒。
使用移液管将冻存管中含有iPS细胞的冻存液轻轻转移至一个含有5-6mL已经预热的完全培养基的15mL离心管中,过程必须轻柔防止吹散细胞团。
室温300g离心5min。
吸出培养基,确保细胞团完整。
然后缓慢加入1mL完全培养基,用手指轻弹离心管底部,使细胞团脱离底部并分散。
轻轻的将此1mL细胞悬液转移至已包被的培养皿/板/瓶,根据最终培养细胞的液体体积,加入ROCK inhibitor Y27632,终浓度为10μM。
将培养皿/板/瓶置于37℃培养箱中,每天更换培养基(换液不需要再添加Y27632,但培养基需提前预热)。
2.2.传代
当集落变得较大、中心变得密集、明亮(对比边缘),相邻的集落开始融合时,此时可进行传代。
传代前, 准备 37 ℃预热好的好无钙镁 PBS 溶液及消化液,完全培养基。
吸走上清,并加入 37℃预热好的 PBS 溶液清洗1次。
加入适量(按 6 孔板每孔加 1ml,6cm 皿加 2ml,10cm 皿加 3ml 的量)的 37℃预热好的消化液。
37℃放置1-2min,用手指轻弹皿/板/瓶身,显微镜下观察到大部分克隆边缘开始脱离培养
皿/板底,克隆内部大部分细胞成团脱落。
加入适量的完全培养基终止消化。
移入离心管,300g离心5min,
离心后重悬(重悬步骤参照复苏4-5步)。
传代比例为 1:6—1:8,根据最终培养细胞的液体体积,加入ROCK inhibitor Y27632,终浓度为10μM。
将培养皿/板/瓶置于37℃培养箱中,每天更换培养基(换液不需要再添加Y27632,但培养基需提前预热)。
2.3.冻存
当集落变得较大、中心变得密集、明亮(对比边缘),相邻的集落开始融合时,此时可进行传代。
传代前, 准备 37 ℃预热好的好无钙镁 PBS 溶液及消化液,完全培养基。
吸走上清,并加入 37℃预热好的 PBS 溶液清洗1次。
加入适量(按 6 孔板每孔加 1ml,6cm 皿加 2ml,10cm 皿加 3ml 的量)的 37℃预热好的消化液。
37℃放置1-2min,用手指轻弹皿/板/瓶身,显微镜下观察到大部分克隆边缘开始脱离培养皿/板底,克隆内部大部分细胞成团脱落。
加入适量的完全培养基终止消化。
移入离心管,300g离心5min。
离心后重悬(重悬步骤参照复苏4-5步)。
使用预冷的冻存液轻轻的重悬细胞团,然后将细胞悬液转移至冻存管,冻存按 6 孔板每孔冻 1 支,6cm 皿冻 2-4 支,10cm 皿冻 6-12 支(冻存液为:90% iPS细胞完全培养基与 10%的DMSO。
业务范围



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文献和实验成了人类诱导多功能干细胞(iPS细胞),日本庆应大学教授冈野荣之的研究小组,仅用先前培育iPS细胞所用4个诱导基因中的两个,即“0ct3/4”基因和“Klf4k”基因,也成功培育出了iPS细胞。因为除了使用逆转录病毒作为基因移植的载体这一因素外[17],造成iPS细胞诱发癌症风险的因素还与先前研究人员使用的4个诱导基因中的一个名为“C-Myc”的基因相关。所以日本科学家的最新方法也可以减少iPS细胞移植后的癌变风险。3. 高效快速建立iPS细胞我国科学家从羊水细胞中快速建立人类iPS细胞。继前不久
胞生物学教授中内启光最近成功地用人类诱导多功能干细胞(iPS细胞)培养出血小板,这在世界尚属首次。中内启光等研究人员采用与日本京都大学教授山中伸弥同样的方法.向人类皮肤细胞植入基因,制成iPS细胞。在培养iPS细胞时,研究人员添加了人类骨髓细胞以及促进细胞增殖的蛋白质等物质结果iPS细胞分化成了血小板的前身巨核细胞;之后,巨核细胞进一步分化成血小板。血小板是哺乳动物血液的重要成分之一,具备收缩血管,形成止血栓,帮助止血等功能。手术中使用的血小板现在主要通过献血采集,在这种情况下血小板只能保存几天,十分不便
iPS细胞的概述IPS细胞是通过导入特定的转录因子可将分化的体细胞重编程为诱导性多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPS cells)。特定的转录因子为 Oct4, Sox2, c-Myc和Klf4 4个因子(这4个因子也称为Yamanaka因子)可以有效地将胎鼠成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast, MEF细胞)和小鼠尾尖成纤维细胞诱导形成形态和生长特点类似ES细胞的克隆, 即iPS细胞。iPS细胞还可让普通体细胞“初始
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