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伊莱博生物科技(上海)有限公司
Chip检测实验操作流程: 1 、样品准备与交联 细胞收集后,用37%的formaldehyde处理细胞,交联核酸与DNA结合蛋白;2. 超声打断染色质 裂解细胞,用Bioruptor将染色质超声破碎成200-1000bp片断;将片段分为两份,一份用于免疫共沉淀,一份用于对照。3 、免疫共沉淀 (IP) 取B步骤所得一份片断与ChIP特异抗体结合进行免疫共沉淀,利用免疫磁珠法富集抗体复合物。4 、解交联及纯化 DNA 将富集的DNA/蛋白复合物解交联释放DNA片段,并进行纯化(IP DNA);B步骤所得用于对照(Input DNA)的片断作不进行IP实验,但也要解交联并纯化。5 、 DNA 段 PCR 扩增 针对ChIP DNA, Input DNA及对照DNA的目的片段设计特异性引物并进行荧光定量PCR扩增。 6 、结果分析
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